培養基的配制是微生物實驗人員的基本技能之一。适宜的培養基制備方法、選擇正确的滅菌方式、貯藏條件和質量控制試驗是提供優質培養基的保證,那麼以下經驗總結不容錯過。
01 常見的質量問題原因分析
問題1 培養基不能凝固
原因分析
制備過程中過度加熱
低pH造成培養基酸解
稱量不正确瓊脂未完全溶解
培養基成分未充分混勻
問題2 pH不正确
原因分析
制備過程中過度加熱
水質不佳
外部化學物質污染
測定是溫度不正确
pH計為正确校準
脫水培養基質量差
問題3 顔色異常
原因分析
制備過程過度加熱
水質不佳
pH不正确
外來污染
脫水培養基質量差
問題4 産生沉澱
原因分析
制備過程過度加熱
水質不佳
pH不正确
原料中的雜質
脫水培養基質量差
問題5 培養基出現抑制/低生長率
原因分析
制備過程過度加熱
水質不佳
脫水培養基質量差
使用成分不正确,添加劑用量不正确
容器或水中的有毒殘留物
問題6 選擇性差
原因分析
制備過程過度加熱
脫水培養基質量差
配方使用不對
添加成分不正确,例如添加成分是培養基過熱、添加濃度錯誤等
問題7 污染
原因分析
無菌操作存在問題
添加劑污染
不适當滅菌
02 注意事項
1、分裝好的培養基應當天進行滅菌處理(2小時内滅菌最佳),分裝的量不宜超過容器的2/3以免滅菌時外溢。
2、實驗室采用濕熱滅菌對培養基進行滅菌處理,按照培養基使用說明采用合适的滅菌溫度和時間。尤其含糖量較高的培養基溫度不應太高,過高會導緻糖分焦化,影響質量。
3、每次制備培養基均應有配制記錄,記錄應複制一份,原記錄保存備查,複制記錄随制好的培養基一同存放、以防發生混亂。
4、培養基應存放于冷暗處,最好放于普通冰箱内。放置時間不宜超過一周,傾注的平闆培養基不宜超過3天。每批培養基均必須附有該批培養基制備記錄副頁或明顯标簽。
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