總酸是指最終能釋放出的氫離子數量,是一個定數。實驗過程中我們常通過滴定法來測定植物中總酸的含量,具體操作流程如下:
一、試劑1.1 0.1mol/L氫氧化鈉标準液:取10g分析純氫氧化鈉,溶于500ml蒸餾水中(事先煮沸,去除其中CO2),貯于塑料瓶中,放置數日。用時取上清200ml,加4倍去CO2水稀釋,并用鄰苯二甲酸鈉标定。
0.1mol/L氫氧化鈉标準液的效價(f)=10•m/0.020414•V
式中:
m為鄰苯二甲酸氫鈉的質量(g);
V為NaOH體積(ml)
1.2 1%酚酞試劑:稱取1g酚酞,溶于100ml95%乙醇中。
二、主要儀器萬分之一分析天平
三、試樣的制備鮮樣混勻後置于4℃保存。
四、分析步驟4.1 試樣溶液制備
稱取新鮮植物組織5g,置于研缽中,加少量石英砂研磨成勻漿,用蒸餾水洗入50ml三角瓶中,加蒸餾水約30ml,置于80℃恒溫水浴中浸提30min,期間攪拌數次。取出冷卻,過濾入50ml容量瓶中,并用蒸餾水沖洗殘渣2~3次,合并濾液,用蒸餾水定容至50ml,充分混勻待測。
4.2 樣品測定
根據預測有機酸的含量,決定提取液的稀釋濃度。用移液管吸取5~10ml樣品提取液于50ml三角瓶中,加入酚酞指示劑3~5滴,用0.1mol/L 氫氧化鈉标準液滴定至出現微紅色,30s不褪色為滴定終點,記錄所消耗溶液的體積,重複3次,取平均值。
五、結果計算
式中:
C——氫氧化鈉标準液濃度(mol/L);
V1——滴定時所消耗的氫氧化鈉标準溶液的體積(ml);
K——換算為某種酸克數的系數
VT——試樣浸提後定容體積(ml);
m——試樣質量(g);
VS——吸取滴定用的樣液體積。
所得結果應保留小數點後三位。
來源:栢晖生物整理
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