體外診斷試劑的種類很多，影響試劑質量的因素也很多，為保證試劑質量，需要設定合理的技術指标進行系統的實驗室以及臨床評價。靈敏度作為一項重要的技術指标，對試劑盒的評價具有重要意義。因為極少量的分析物可能對界定疾病狀态、疾病篩查或揭示是否存在有毒物質、污染物質、傳染病原體等具有重要意義。當前，企業标準中各種術語使用混亂，如靈敏度、分析靈敏度、最低檢測限、功能靈敏度、檢出限、定量限等，實驗室和臨床經常将最低檢測限、檢出限、靈敏度或分析靈敏度等互換使用。本文對在檢測中遇到的各種靈敏度檢測方法進行闡述。

一，不同術語的含義

ISOl8113中指出，檢驗醫學中“靈敏度”有兩個不同但相笑聯的含義：具有适當的可信限度，可以區分最小的濃度改變或變化；具有适當的可信限度檢出分析物的最小濃度或量。

在相當長的一段時間内檢出限與靈敏度這兩個相關但又不同的概念常被混淆或等同起來。存在這種混淆是因為這兩個術語互相關聯——兩者都被認為有方法“靈敏”的特性。實際上，理想的方法是描述為具有高的分析靈敏度水平和低的檢出限。

分析靈敏度為：國際理論和應用化學聯合會(IUPAC)将方法的分析靈敏度定義為校準曲線的斜率及對于規定量的變化分析程序産生信号的變化。事實上，即使斜率校準曲線是陡峭的，如果測量信号變異系數高。可以可靠檢測的最低檢測限可能較大。與此相反，校準曲線斜率較小，但測量信号變異系數低，可以可靠檢測的最低檢測限較小。

空白限值是指在無分析物樣本檢測中一定概率下的最大值。檢出限與最低檢測限含義一緻，國際理論和應用化學聯合會IUPAC将檢出限定義為給定分析程序具有适當的可信限度檢出分析物的最小濃度或量。檢出限依賴于空白讀數大小，并且被認為與測量的精密度有關。定量限在IS018113中定義為給定分析程序能定量檢測分析物的最小濃度或量。

功能靈敏度定義為：以天間重複變異系數為20％時對應檢測限樣品具有的平均濃度，确定檢測系統或方法可定量報告分析物的最低濃度或其他量值的限值。功能靈敏度最初主要用于評價甲狀腺激素和促甲狀腺激素的免疫學測定，功能靈敏度已被錯誤地應用于其他激素，目前它比定量限和檢出限并不具有任何優勢。臨界值是指分析檢測時的特定量值水平，該水平用于決定分析檢測是否高于或低于臨床或分析決定水平(通常是陰性或陽性)。

二，不同靈敏度的檢測方法确定

空白限值的一般方法為：對于一個給定的檢測方法，開發或制造商測定後給出一系列空白樣本的結果和一系列低濃度樣本的結果。空白樣品的測定用于提供一個阈值，從而可以判斷在測定結果比阈值高的樣本中含有分析物。對于空白檢測值對稱分布的情況。可通過檢測一定數量的陰性樣品或正常樣品，樣品的數量要根據樣品的離散情況來定，計算樣品的均值及标準差，均值加上2個标準差即為空白限值，即在空白限值以上的樣品有95％的可能為真陽性。

檢測方法常以用零濃度校準品或樣本稀釋液作為樣本，重複測定20次，計算20次測量結果RLU(相對發光值)的平均值(M)和标準差(SD)，得出M 2SD的RLU值。然後再轉換成濃度單位。對于檢測值小于零不報道或非對稱分布的空白值(非高斯分布的空白值)。95％分位值必須用其他方法。最直接的方法是應用統計原理基于值大小排列，95％百分位數可估計為空白限值。要确定檢出限必須考慮尋找一個檢測結果有特定概率的可能性超過空白限值的最小濃度樣本，如檢測結果95％的可能性超過空白限值。

在實際工作中應采用考察空白限值的同時進行多份低濃度樣本的檢測，計算低濃度樣本的總标準偏差，根據公式LOD=LOB cBSD計算檢出限，其中LOD為檢出限、LOB為空白限值、CB為校正因子、SD為低濃度樣本的總标準偏差。在驗證檢}乜限時采用的方法為檢測含有标示檢出限量值濃度的樣本，計算檢測結果超出空白限值的比例。定量限确定的方法和檢出限類似，驗證方法也類似。在定性試驗中進行臨界值的确定有許多種方法。如以陰性對照均值加上兩倍或三倍标準偏差作為臨界值、以百分位數法單側95％或99％來确定臨界值、使用ROC曲線設定臨界值等。臨界值的驗證可以通過制備在臨界值上下20％左右濃度的樣本進行。

一般來說，臨界值上下20％左右為95％區間。可以進行重複檢測，看檢測結果是否滿足95％的陰性和95％的陽性，從而判斷臨界值的确定是否合适。美國國家臨床标準研究院(CLSI)發布了EP一17的标準化文件。該文件提出空白限值(LOB)、檢H；限(LOD)以及定量限(LOQ)的定義和實驗方案。

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