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tk基因作為選擇性标記的原理

生活 更新时间:2024-12-29 01:09:33

tk基因作為選擇性标記的原理(菌的人群定植差異和其靶向益生元研究)1

Akkermansia muciniphila (AKK) 菌在宿主内腔粘膜表面充當重要角色,調節機體健康,近年來成為腸道微生态和益生菌研究熱點。有研究采用熒光定量PCR 完成兩個不同年齡階段中國人群的AKK 菌長度定植分析,通過體外消化腸道模拟系統評估該菌在腸道微生态中的變化規律,以及利用Bioscreen- qPCR 技術篩選AKK 菌的潛在靶向益生元。收集廣州地區兩個年齡階段的人群糞便(n=131),利用qPCR 技術分析AKK 菌的定植情況為:總體定植率為89.31%,平均豐度為5.825 lg (CFU/mL);其中年輕人群(18- 30 歲,n= 35)的定植率為88.57%,平均豐度為7.522 ± 0.2346 lg (CFU/mL);老年人群(˃50 歲,n = 96)的定植率為89.58%,平均豐度為5.213 ± 0.152 lg (CFU/mL);

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個體相關資料中,不同分組的AKK 菌豐度具有極顯著差異的為:年齡、精神創傷史、BMI 值;具有顯著性差異的為:腹瀉史、膽囊類病症、日均坐立時間、吸煙習慣;16S rDNA 基因組測序結果顯示:AKK 菌加入到腸道消化模拟系統後, 對Bifidobacteria 屬和Bacteroidetes 屬具有一定的抑制效果,對Lactobacillus 屬具有促進作用;AKK 菌在24h 内的豐度變化較小,說明該菌在新的腸道環境中具備生存能力;在菌門水平上,2h、14h 和24h 間豐度均出現降低的菌門為Bacteroidetes 和Firmicutes ,豐度均上升的菌門為Protecbacteria ;在菌屬水平上,Escherichia_Shigella出現明顯增長,其餘大部分菌屬均呈現下降的趨勢;在菌種水平上,Lactobacillus vaginalis、Lactobacilluslactis、Lactobacillus johnsonii、Streptococcus gallolyticus.subsp 的豐度均呈現增長,Oscillospiracesebacterium 的豐度大幅降低,Lachnospiracese bacterium 的豐度較為穩定;在菌落總體結構上,AKK 菌對腸道微生态的結構無顯著影響,說明其對腸道菌群組成沒有破壞性。AKK 菌的潛在靶向益生元的篩選:采用油層厭氧技術、qPCR 技術、Bioscreen 檢測技術。

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綜合評價各種化合物對AKK 菌的生長促進效果,結果顯示:阿魏酸酯、β- 燕麥-D- 葡聚糖、水蘇糖、低聚半乳糖、多聚果糖對AKK 菌的生長促進作用明顯。

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