水産養殖病理學實驗室發現,有确鑿證據表明,EHP不是唯一導緻南美白對蝦出現白便綜合症(WFS)的病原體。
一、腸道微生物群,在對蝦養殖當中的作用。
蝦腸道微生物群對寄主的營養、生長、抗病原體和維持體内穩定,起到到至關重要的作用。蝦類的雜食性和同類相食等特性,使寄主容易受到病原菌的侵襲,那些替代微生物定殖,使腸道微生物群不穩定,這導緻在多樣化的胃腸道(GI)感染的重要原因。
雖然對蝦腸道微生物提供的特異性免疫機制的信息有限,但有證據表明,其與消化活動的相互作用,直接影響對蝦的生長和疾病的嚴重程度。同樣,新出現的疾病往往以蝦的肝胰髒為目标,導緻生長抑制、大小差異、食欲減退和慢性死亡。最近發現,表現出這些臨床症狀的蝦病,是由對蝦腸細胞蟲 (EHP) 和白便綜合征 (WFS) 引起的肝胰腺微孢子蟲病 (HPM) , 其病原體或病原體仍未确定。
HPM是一種由包括EHP在内的幾種微孢子蟲[形成孢子的單細胞寄生蟲] 引起的對蝦肝胰腺疾病。這種微孢子蟲已在幾個亞洲國家發現,如:中國、越南、馬來西亞、印度尼西亞、泰國和印度。最近,在南美洲的西半球也有報道感染EHP。在對蝦養殖當中,EHP的主要臨床症狀是對蝦生長遲緩,大小異常和飼料轉化率(FCR)增加。在疾病的晚期,EHP感染的蝦通常表現出軟殼和慢性死亡。
在養殖場當中,WFS最明顯表現是,水面上漂浮着白色的糞便。池塘中的蝦表現出不尋常的臨床症狀,如:生長速度慢,大小差異,胃腸呈淡黃色至白色,軟殼,以及慢性死亡。雖然EHP和WFS之間的聯系一直被認為是存在的,但沒有研究證實這種明顯的聯系。即使在被嚴重EHP感染時,WFS并不總是出現,這些觀察表明WFS是由一種以上微生物相互作用的結果,但是另一種病原體尚未确定。
今天的研究,主要是分析白便綜合症(WFS)的緻病體,到底是不是EHP。
二、研究設計
1、特異性無病原體(SPF)的南美對蝦幼蝦,從夏威夷瓦胡島海洋研究所獲得。
2、對感染WFS的南美白對蝦,進行副溶血性弧菌的分離,及接種物制備WFS的實驗挑戰;組織病理學和原位雜交;副溶血性弧菌的PCR和定量PCR檢測及EHP的定量研究,并進行統計分析,。
三、結果與讨論
1、我們的研究結果首次描述了WFS在蝦體内的實驗繁殖,南美白對蝦預先感染EHP(主要病原體),并受到一種特殊的副溶血性弧菌(次要病原體)的侵擾,這種弧菌是從顯示WFS的蝦的胃腸道分離出來的。
圖1:從感染WFS的南美白對蝦胃腸道中分離出副溶血性弧菌。南美白對蝦幼蝦出現白色腸道(GI),這是WFS的臨床表現。
表1:在兩項獨立試驗中,對預感染EHP并接受副溶血性弧菌(WFS分離株)挑戰。
圖2:這些蝦預先感染了EHP,并通過浸泡途徑受到副溶血性弧菌的挑戰。
2、白便綜合征非常難以确定病因,有些研究獲得的結果也相互矛盾。例如,一些作者報告說WFS不是由EHP引起的,而另一些作者則發現了EHP和WFS之間有明确聯系的有力證據。還有研究聲稱霍亂弧菌是WFS的病因,但是這些研究結果沒有得到其他研究人員的證實,因此,WFS的病因在世界範圍内的一個謎團。
3、在實驗室挑戰實驗中,我們能夠确認僅在預先感染EHP,并随後暴露于副溶血性弧菌分離株的蝦,感染了白便綜合症。這表明,為了誘導蝦感染WFS,EHP和這種特殊的副溶血性弧菌都是必需的。僅感染EHP或副溶血性弧菌,蝦不會發生WFS。因此,WFS表現涉及兩種病原體的獨特組合,這兩種病原體以前未在已知的任何蝦傳染病中觀察到。
表2:南美白對蝦預感染EHP,并受到弧菌挑戰,蝦的組織病理學和PCR數據。
4、胃腸道的改變,其中疾病的征兆是白色糞便,對所有動物(包括人類)都是常見的。在人類中,白便是由腸道微生物組的變化或特定的病原體引起的。蝦的WFS也可能如此,其中病原體是由兩個不同的病因引起的。我們的研究清楚地表明,蝦白便的也是由兩個病原體引起,并且EHP在這種綜合征疾病爆發中,起着核心作用。
四、研究結論
我們的研究提供了确鑿的證據,證明EHP并不是白便綜合征唯一的病原體,而EHP 一種特殊的副溶血性弧菌,是蝦感染WFS的原因。然而,除副溶血性弧菌外,其他弧菌物種 EHP,也可能誘發WFS。
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