分光光度計操作?分光光度法是指應用分光光度計的分析方法,具有靈敏、準确、快速及選擇性好等特點,下面我們就來聊聊關于分光光度計操作?接下來我們就一起去了解一下吧!
分光光度法是指應用分光光度計的分析方法,具有靈敏、準确、快速及選擇性好等特點。
通常所測樣品溶液濃度下限可達10-6~10-5mol/L,适用于測定食品中的微量組分(如肉制品中的亞硫酸鹽、糖果中的二氧化硫等)。
一、原理
1.1 物質對光的選擇性吸收當光束照射到物質上時,光與物質發生相互作用,産生反射、散射、吸收或透射。若被照射的是均勻溶液,光的散射可以忽略。1.1.1 溶液顔色的産生當一束白光通過某一有色溶液時,一些波長的光被溶液吸收,另一些波長的光則透過溶液。透射光或反射光刺激人眼使人感到顔色的存在。人把自身能感覺到的光定義為可見光。在可見光區,不同波長的光呈現不同的顔色,因此溶液的顔色由透射光的波長所決定。透射光與吸收光可組成白光,故稱這兩種光互為補色光,兩種顔色互為補色。
1.1.2 光吸收的本質當一束光照射到某物質或其溶液時,組成該物質的分子、原子或離子與光子發生“碰撞”,光子的能量就轉移到分子、原子或離子上,是這些粒子由最低能态(基态)躍遷到較高能太(激發态),這個作用稱為物質對光的吸收。被激發的粒子約在10-8s後回到基态,并以熱或熒光等形式釋放出能量。分子、原子或離子具有不連續的量子化能級,僅當照射光光子的能量hυ,與被照射物質粒子的基态和激發态能量之差相當時,才能發生吸收。不同物質微粒由于結構不同而具有不同的量子化能級,其基态和激發态能量差也不相同。所以物質對光的吸收具有選擇性。
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