試劑中的純化水電導率标準?SDS-PAGE凝膠制備屬于實驗室最常規的操作了，剛開始做蛋白實驗總是在找凝膠配制實驗中所用試劑的配方，這裡總結了分離膠、濃縮膠、分離膠和濃縮膠緩沖液、考馬斯亮藍染液、樣品緩沖液、電泳緩沖液等配方1. 分離膠(12%)，今天小編就來說說關于試劑中的純化水電導率标準?下面更多詳細答案一起來看看吧!
SDS-PAGE凝膠制備屬于實驗室最常規的操作了，剛開始做蛋白實驗總是在找凝膠配制實驗中所用試劑的配方，這裡總結了分離膠、濃縮膠、分離膠和濃縮膠緩沖液、考馬斯亮藍染液、樣品緩沖液、電泳緩沖液等配方。1. 分離膠(12%)
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配制 |
所需試劑 |
所需體積 |
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分離膠(12％) |
30％丙烯酰胺 |
6.0 ml |
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1.5 mol/l Tris-HCl |
3.8 ml | |
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10%SDS |
150 μl | |
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10%過硫酸铵 |
150 μl | |
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TEMED |
6 μl | |
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蒸餾水 |
4.9 ml |
2. 濃縮膠(5%)
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配制 |
所需試劑 |
所需體積 |
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濃縮膠(5％) |
30％丙烯酰胺 |
1.3 ml |
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1.5 mol/l Tris-HCl |
1.0 ml | |
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10%SDS |
80 μl | |
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10%過硫酸铵 |
80 μl | |
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TEMED |
8 μl | |
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蒸餾水 |
5.5 ml |
3. 分離膠緩沖液(pH8.9)
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配制 |
所需試劑 |
所需體積 |
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分離膠緩沖液 |
Tris |
36.6 g |
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1 mol/l HCl |
48 ml | |
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蒸餾水 |
補足至100 ml | |
4. 濃縮膠緩沖液(pH6.7)
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配制 |
所需試劑 |
所需體積 |
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濃縮膠緩沖液（pH6.7） |
Tris |
5.98 g |
|
1 mol/l HCl |
48 ml | |
|
蒸餾水 |
補足至100 ml | |
5. 30%丙烯酰胺(pH≤7.0)
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配制 |
所需試劑 |
所需體積 |
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30%丙烯酰胺（pH≤7.0） |
丙烯酰胺 |
29 g |
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甲叉-雙丙烯酰胺 |
1 g | |
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蒸餾水 |
補足至100 ml | |
6. 10%過硫酸铵(W/V)：1g過硫酸铵溶于10ml水中，4℃保存數周，盡量現用現配。7. 10%SDS：将10 g SDS溶于80ml重蒸水中并輕緩攪拌(室溫低時需水浴加熱溶解)，再定容至100ml，室溫存放。8. 樣品緩沖液
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配制 |
所需試劑 |
所需體積 |
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樣品緩沖液 |
1 M Tris-HCl（pH6.7） |
5 ml |
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SDS |
2.5 g | |
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巯基乙醇 |
1 ml | |
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溴酚蘭 |
0.05 g | |
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蔗糖 |
10 g | |
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蒸餾水 |
補足至100ml |
9. 考馬斯亮藍染色液：0.25g考馬斯亮藍R-250用少量甲醇溶解後，用甲醇(40ml)-乙酸(10ml)水溶液稀釋至100ml。10. Tris-甘氨酸電泳緩沖液(pH8.3)
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配制 |
所需試劑 |
所需體積 |
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Tris-甘氨酸 電泳緩沖液（pH8.3） |
Tris堿 |
15.1 g |
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甘氨酸 |
94 g | |
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10％（W/V）SDS |
50 ml | |
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去離子水 |
補足至100 ml |
凝膠配制所需試劑的母液不能放置太久，有條件的實驗室可将母液保存在4度冰箱中，放置母液被微生物污染或者出現沉澱。
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