胎牛血清(FBS)是最常用的血清添加劑,因為它富含生長因子、蛋白和大分子。盡管無血清和非動物來源的培養基也逐漸走紅,但許多細胞系未必适用,并且存在費用較高和生長較慢等缺點。那麼,研究人員在評估FBS的質量時,需要考慮哪些标準呢?
對于細胞培養而言,血清的重要性不言而喻。它含有蛋白、生長因子、氨基酸、脂類、碳水化合物、維生素及其他組分,可以促進貼壁或懸浮細胞的生長和維持。胎牛血清(FBS)是最常用的血清添加劑,因為它富含生長因子、蛋白和大分子。盡管無血清和非動物來源的培養基也逐漸走紅,但許多細胞系未必适用,并且存在費用較高和生長較慢等缺點。
目前,市場上存在着不同等級的FBS。由于FBS關乎細胞活力和實驗重複性等重要的參數,故在質量方面是絕對不能含糊的。若質量不穩定,則有可能導緻實驗失敗。科羅拉多大學的癌症生物學家Matthew Sikora就比較倒黴,因為連續幾批血清沒有通過初步篩查,他的實驗室已經停滞了幾個月。
“僅從人力和耗材上考慮,失敗的實驗已經浪費了超過4.5萬美元。我們認為,血清的變化也許能解釋我們為什麼無法獲得一緻的結果,”Sikora博士說。“研究人員若不測試他們的血清,也會陷入麻煩,付出昂貴的代價。”那麼,研究人員在評估FBS的質量時,需要考慮哪些标準呢?
可追溯性
對于科學家而言,最大的風險也許是FBS的純度大打折扣,這可能導緻細胞培養實驗的效果不佳。許多FBS的賣家與多個産地簽訂短期供應協議來采集原材料,以便降低成本。他們将這些産品混合,稀釋不同來源的影響。然而,最終結果就是質量不穩定,産品供應和價格出現波動。
針對這一問題,國際血清行業協會(ISIA)實施了供應鍊可追溯性的行業标準,這對确保FBS各個批次的質量、安全性和重複性起了關鍵作用。一些公司提供化學分析,說明原産國的統計概率。也許最好的方法是追溯到動物,以确保産品的來源。
FBS的供應商是否在整個供應鍊中都保留原産地的可追溯記錄?他們是否持有文件,支持各個階段的處理、運輸和商業交易?他們能否展示獨特來源的可追溯性,以确保重複性和低病毒風險?在考慮購買FBS時,這都是你需要考慮的問題。
不知你是否聽說過,地域性風險評估(GBR)是定性評估一個國家或地區的動物感染疾病(如瘋牛病)的可能性。這種方法依賴世界動物衛生組織(OIE)的監控系統,将每個國家或地區的瘋牛病風險進行分類。OIE評估各個國家的獸醫服務、疾病診斷能力、覺察症狀能力及其他因素,以避免瘋牛病的傳播。
新西蘭和澳大利亞都獲得了GBR 1級,這意味着它們目前是沒有瘋牛病和口蹄疫的。這兩個國家都是出了名的病毒風險最低的國家。由于環境受到保護,以及嚴格的農業法規和入境要求,再加上它們都是島國,動物們不太可能受到其他地區疾病的影響。這對于那些敏感的細胞系和實驗而言特别有用。對科學家來說,好處是花在重複實驗或檢驗新批次上的時間将大大減少。
産品質量
對血清而言,産品質量尤為關鍵。由美國食品和藥品管理局(FDA)執行的cGMP規範建立了完整體系,以确保制造過程和工廠的正确設計、監控和控制。在購買血清時,你最好選擇遵從cGMP規範的供應商,以便降低産品混合和标簽錯誤的風險。
确保各批次一緻性還涉及其他因素,包括牛群環境、食物來源以及質量控制檢測程序。正确采集血清,才能保證它天然的促進生長特性,并實現FBS産品的出色表現。當然,這些資料收集起來可不容易,那麼你可以依靠國際公認機構(如FDA、USDA、AQIS等行業協會)的認證,來尋找理想的供應商。
穩定價格
有時,FBS的價格會大幅波動,這取決于許多因素。作為肉類行業的副産品,FBS的生産在本質上會受到天氣和食物供應、經濟條件和牛群規模等各種因素的影響。如果病毒不定期再來搗亂一下,那麼牛的數量必然下降,FBS的供應也勢必減少。此外,由于幹旱導緻奶牛飼養費用較高,農民可能會将牛賣掉或屠宰,導緻牛群數量下降。
值得一提的是,全世界對FBS的需求還在不斷增加。每年,全球大約生産600,000 L的FBS,其中cGMP等級的不足200,000 L,而後者正是大多數工業生産公司的要求。随着大型制藥公司的需求上升,FBS的價格也在持續上漲。此時,找到一家可以提供同批次FBS的供應商是十分必要的,這既确保了産品供應,也在一定程度上避免價格波動。
産品檢測
定期的産品檢測當然也不能少。大家應注意産品的供應商是否定期進行生化、激素、病毒和功能方面的檢測,包括檢測細菌、病毒及其他微生物是否存在,以确保産品經過全面鑒定。質量控制檢測也應當開展,以确保血清産品始終符合規定并合乎規格。
結語
總的來說,FBS及其他血清有可能大大影響細胞培養工作的質量和重複性。因此,在購買過程中,我們有必要對FBS的身世、質量以及質檢過程做到心中有數,而不僅僅被價格所左右,這樣才能改善實驗結果,節省寶貴時間。
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