免疫組織化學染色分析?1. 目的：為了規範免疫組化染色過程中各步驟的規範化操作，以期獲得免疫組化結果的标準化，特制定本規範，現在小編就來說說關于免疫組織化學染色分析?下面内容希望能幫助到你，我們來一起看看吧!

免疫組織化學染色分析

1. 目的：為了規範免疫組化染色過程中各步驟的規範化操作，以期獲得免疫組化結果的标準化，特制定本規範

2. 範圍：适用于本科室免疫組化實驗室進行的所有免疫組化檢測；

3. 權責：

3.1 本科室病理醫生根據診斷需要申請免疫組化檢測項目，在技術員完成染色後判讀結果；

3.2 免疫組化室技術員根據病理醫生申請的項目完成免疫組化的染色工作；

4. 定義：免疫組織化學是指在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織呈色反應,借助可見的标記物,對相應的抗原或抗體進行定位,定性和定量檢測的一種免疫檢測方法；

5. 作業内容：

5.1 取材、固定、組織處理：參照《常規制片質量管理制度》；

5.2 診斷醫生電子申請免疫組化，組化室技術員核對并提交檔案室準備所需蠟塊，預先把标記及病理号記錄于載玻片上；

5.3 切片：切片厚度3-4um，采用陽離子玻片撈片，60°溫箱烘烤過夜；脫蠟步驟參照《常規制片質量管理制度》；

5.4 抗原修複：采用熱修複法，具體步驟如下：

5.4.1 在盛裝PH6.0檸檬酸緩沖液的電飯鍋内放入切片；

5.4.2 煮沸；

5.4.3 保溫30分鐘，自然冷卻；

5.5 染色方法：采用EnVision二步法

5.5.1 PBS沖洗，3*5分鐘

5.5.2 滴加3%的H2O2阻斷内源性過氧化物酶，室溫孵育5-10分鐘

5.5.3 PBS沖洗，3*5分鐘

5.5.4 一抗室溫孵育60分鐘

5.5.5 PBS沖洗，3*5分鐘

5.5.6 EnVison二抗室溫孵育30分鐘

5.5.7 PBS沖洗，3*5分鐘

5.5.8 DAB顯色，光鏡下控制

5.5.9 蒸餾水沖洗終止顯色，蘇木素複染；

5.5.10 梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固；

5.6 核對：完成的片子貼上标簽，按開單醫生歸類并交于醫生，在電腦上做記錄。

5.7 質控對照：相關的陽性對照切片顯示陽性結果，陰性對照顯示陰性結果，判定染色質量合格。

5.7.1 陽性對照：每張切片均設陽性對照片，在需檢測的組織切片上端附貼已知陽性組織片，陽性對照結果為陽性；

5.7.2 陰性對照：由組織切片内對照完成，檢測結果為陰性；

5.8 抗體的保存：所有第一抗體及檢測二抗系統均保存于4°冰箱；在抗體的有效使用期内使用。

2020.03

更多精彩资讯请关注tft每日頭條，我们将持续为您更新最新资讯!