之前我們介紹了三種常用的蛋白定量方法,其中之一就是蛋白-銅螯合化學試劑法,即BCA法。今天就聊聊基于此原理我們開發的BCA蛋白濃度測定試劑盒。
BCA蛋白濃度測定試劑盒是目前世界上最常用的兩種蛋白濃度檢測方法之一,基本原理如下:
下面介紹一下ACE的試劑盒性能
BCA試劑盒标準曲線
BCA試劑盒可以檢測的蛋白濃度範圍為20-2000 µg/mL,如果需要檢測的未知樣品濃度比較低,精确度要求較高,可以選擇低濃度标準品範圍(5-250 µg/mL),同樣也能制作出較完美的标準曲線,用于蛋白定量。
工作液的穩定性
工作液0小時和24小時的标準曲線對比
BCA工作液配制好後,室溫可以穩定存放24h,期間制作的标曲不會發生變化,穩定性好。
BCA試劑保存條件
我們的試劑盒所含試劑可以在室溫下穩定保存較長時間。
試劑盒保存标準曲線測試
常溫條件下保存,不同時間取樣制作的标準曲線重疊性高。後續時間測試暫未列出。
BCA試劑盒耐受測試
該試劑盒測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響,可以兼容樣品中高達5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20、60、80。同時也可耐受10 mM EDTA ,100 mM 檸檬酸鈉。
BCA試劑盒對各試劑的耐受濃度,請參照下表。
BCA試劑盒特點
BCA蛋白定量有以下特點:1.在20-2000 µg/mL濃度範圍内有較好的線性關系。2.表面活性劑對濃度檢測的幹擾較小,但對還原劑和螯合劑不耐受。3.不同蛋白用BCA試劑盒檢測,都會有獨特的吸光度反應。通常使用BSA作為标準定量未知蛋白的濃度,但如果需要精确定量,請使用高純度目的蛋白做标準品。
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