母源抗體是一類新生兒通過胎盤、初乳等途徑從母體獲得的一種特殊特異性抗體, 是哺乳動物胎盤和乳汁中能抵抗緻病原的一類特殊蛋白質。由于新生仔豬免疫系統發育尚不完善, 免疫力和抗病力相對較弱, 極易感染這種緻病源而發生死亡, 而從母體内獲得的母源抗體能在相當長的一段時間内保護仔豬免受各種病原體的感染, 母源抗體成為仔豬抵抗各種緻病源的關鍵, 但仔豬體内高水平的母源抗體能與疫苗發生特異性中和反應, 降低疫苗免疫效果, 甚至造成免疫失敗。豬瘟一直以來都是危害我國養豬業的主要動物傳染病, 多年來我國通過采取以疫苗免疫接種為主的綜合防控措施有效控制了豬瘟的流行, 但豬瘟的感染在我國部分地區仍時有發生, 非典型性豬瘟仍具有一定發病率, 造成此種現象的原因衆多, 但疫苗免疫失敗或疫苗免疫效果降低是一個重要因素, 而母源抗體又是影響豬瘟疫苗免疫效果的一個重要因素[4]。鑒于此, 本研究探讨了母源抗體水平對仔豬豬瘟疫苗免疫效果的影響, 為仔豬豬瘟疫苗免疫程序的制定提供參考, 為提高豬瘟疫苗免疫效果提供方法。
1 材料與方法
1.1 試劑盒、疫苗
豬瘟病毒阻斷ELISA 抗體檢測試劑盒購自北京世紀元亨動物防疫技術有限公司; 豬瘟活疫苗(傳代細胞源) 購自山東綠都生物科技有限公司。
1.2 試驗仔豬
體重、健康狀況基本一緻的40 頭21 日齡斷奶仔豬(由年齡、胎次、免疫程序均一緻的母豬所産) 由XX 養殖場(請作者添加) 提供。
1.3 試驗分組與疫苗免疫
将40 頭21 日齡斷奶仔豬随機分為A、B、C、D 4 個處理組, 每組10 頭仔豬, A 組、B 組、C 組、D 組的試驗仔豬分别在21、28、35、42 日齡免疫1.5 頭份的豬瘟活疫苗(傳代細胞源)。
1.4 試驗方法
1.4.1 血清樣品的采集
分别在疫苗免疫當天以及疫苗免疫後的第7、14、21、28、60、90、120、150 天于各處理組試驗仔豬的前腔靜脈處采集血清1.0ml, 常規方法分離血清。
1.4.2 抗體檢測
利用豬瘟病毒阻斷ELISA 抗體檢測試劑盒分别檢測各處理組試驗仔豬在疫苗免疫前的母源抗體水平, 以及疫苗免疫後7、14、21、28、60、90、120、150d 的免疫抗體水平。
1.4.3 結果判定
當試劑盒内陰性對照血清的OD 值大于1.0, 且陽性對照血清的阻斷率大于50%時試驗成立。在試驗成立的條件下, 被檢血清樣品的阻斷率/%= (1–被檢樣品的OD 值/陰性對照血清的OD 值) ×100, 當被檢血清樣品的阻斷率大于40%為陽性, 介于30%~40%之間為可疑, 小于30%為陰性。
1.4.4 抗體水平比較分析
對各處理組試驗仔豬在疫苗免疫前及疫苗免疫後的抗體水平(抗體阻斷率) 進行比較分析, 确定該豬場仔豬進行豬瘟疫苗接種的最佳首免日齡。
2 結果與分析如附表所示, A 組在疫苗免疫時(21 日齡) 的母源抗體水平較高, 至疫苗免疫後第28 天免疫抗體開始轉陽, 至疫苗免疫後第90 天免疫抗體水平達到峰值。B 組在疫苗免疫時(28日齡) 的母源抗體水平稍高, 至疫苗免疫後第14 天免疫抗體開始轉陽, 至疫苗免疫後第60 天免疫抗體水平達到峰值。C 組和D 組分别在疫苗免疫時(35 日齡和42 日齡) 的母源抗體水平較低, 分别至疫苗免疫後第14 天免疫抗體開始轉陽, 分别至疫苗免疫後第28 天免疫抗體水平達到峰值, 此後一直維持在較高水平。該結果表明, 豬瘟疫苗免疫時母源抗體水平越高, 疫苗免疫後的免疫抗體轉陽時間越晚, 免疫抗體達到峰值所需的時間也越長。
3 讨論與結論
普遍認為, 仔豬在斷奶時(21 日齡) 可以進行豬瘟疫苗首免, 但本試驗結果表明, 仔豬斷奶時(21 日齡) 仍然具有非常高的母源抗體水平, 此時進行豬瘟疫苗首免後, 需要28d 免疫抗體才能轉陽, 且免疫抗體達到峰值的時間較晚, 疫苗保護效果大大降低。本試驗結果表明, 當仔豬28 日齡時, 其母源抗體水平雖然下降至臨界值以下, 但仍維持在一定水平, 此時進行豬瘟疫苗首免, 雖然免疫後免疫抗體轉陽所需的時間與母源抗體陰性仔豬(35 日齡和42 日齡) 轉陽所需的時間一緻(均在疫苗免疫後14d 轉陽), 但免疫抗體達到峰值所需的時間較長, 且峰值抗體的抗體水平較母源抗體陰性仔豬(35 日齡和42 日齡) 低。由于仔豬35 日齡和42 日齡時母源抗體水平較低, 此時進行豬瘟疫苗首免, 雖然疫苗免疫後能迅速産生免疫抗體, 免疫抗體達到峰值所需的時間較短, 峰值抗體水平較高, 但進行豬瘟疫苗免疫前已經産生了免疫空白期, 免疫空白期内感染豬瘟病毒的可能性增加。故綜合本試驗研究結果确定該豬場豬瘟疫苗免疫的最佳時間段應為28~35 日齡。
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