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光學顯微鏡的基本工作原理

生活 更新时间:2024-08-11 02:34:34

星馳科普 第23期:光學顯微居然有極限!怪不得我們要用電子顯微鏡!

注意,文章為頭條号 俊采星馳(QQ訂閱号:juncaixingchi) 原創,未經允許,禁止轉載。歡迎在評論區提出不同意見和疑問。

很多人都認為,光學是沒有極限的,也很不理解為何光學顯微鏡存在極限,其實這一切的原因歸于:光學衍射極限。

光學顯微鏡的基本工作原理(光學顯微居然有極限)1

由于光是一種電磁波,具有衍射和幹涉的特性。

光學顯微鏡的基本工作原理(光學顯微居然有極限)2

圖 1. 光學顯微鏡簡化示意圖

如上面的簡圖所示,紫色箭頭表示的物體 PQ 經過物鏡等之後在相機上成像為P'Q'。由于光的衍射,物體上的點如 P、Q,在相機上并不是單獨的點,而是一個個有一定大小的斑,被稱為夫琅禾費衍射斑(或稱艾裡斑),如右側的同心圓所示。那麼,當 P'、Q' 相距太近的時候,兩個斑會疊加導緻難以分辨。這就要求物體上的 P、Q 要相距一定的距離。

這個公式就是光學顯微鏡的分辨率公式,或稱為光學衍射極限。(注意此處的分辨率與通常說的顯示器分辨率含義不同)

其中λ為光的波長,n 為物方的折射率,θ為物體與物鏡邊緣連線和光軸的夾角。如上圖所示。為方便起見,其中的

光學顯微鏡的基本工作原理(光學顯微居然有極限)3

通常稱為數值孔徑,簡寫為 NA。

攝影領域常用 f/# 或稱光圈值來描述鏡頭,光圈值與數值孔徑可以相互換算。對于一枚光圈為 2.0 的鏡頭來說,數值孔徑為 0.25,其分辨能力約 1.2 微米。

目前常用的高倍物鏡 NA 最大為1.49,可以算出,對于可見光,比如波長 500 納米的綠光,顯微鏡的分辨率約為 200 納米。所以,即使再提高物鏡的放大倍率,也不能提高顯微鏡的分辨率。

而 200 納米這個數值也就通常被稱作衍射極限。

所以,低于200Nm的通常我們會用電子顯微鏡(無色)來掃。

感謝閱讀。

頭條号:俊采星馳 , QQ公衆号:俊才星馳(juncaixingchi)。

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