培養方法

1、非試管微組織快繁

非試管微組織快繁技術是将外植體(一般要求帶一葉一芽)放置在室内外普通沙子培養基上進行培養，利用植物腋芽自然倍增達到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生長出根系。此技術投資低，操作環節少。

2、試管組織培養

試管組織培養是将外植體(即離體組織、器官或細胞)放置在組培瓶等器皿中在無菌的條件下進行組織培養獲得組培瓶苗。

培養步驟

第一步，将采來的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔細洗幹淨，如用适當的刷子等刷洗。把材料切割成适當大小，即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數小時，沖洗時間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細小的材料，可裝入紗布袋内沖洗。流水沖洗在污染嚴重時特别有用。洗時可加入洗衣粉清洗，然後再用自來水沖淨洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附着在植物表面的污物，除去脂質性的物質，便于滅菌液的直接接觸。當然，最理想的清洗物質是表面活性物質-吐溫。

第二步是對材料的表面浸潤滅菌。要在超淨台或接種箱内完成，準備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手表等。用70%酒精浸10~30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用，加之70%酒精穿透力強，也很易殺傷植物細胞，所以浸潤時間不能過長。有一些特殊的材料，如果實、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗，多層鱗片的休眠芽等等，以及主要取用内部的材料，則可隻用70%酒精處理稍長的時間。處理完的材料在無菌條件下，待酒精蒸發後再剝除外層，取用内部材料。

第三步是用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多，可根據情況選取1~2種使用見表。第四步是用無菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，視采用的消毒液種類，涮洗3~10次左右。無菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細胞的副作用注意:①酒精滲透性強，幼嫩材料易在酒精中失綠，所以浸泡時間要短，防止酒精殺死植物細胞。②老熟材料，特别是種子等可以在酒精中浸泡時間長一些，如種子可以浸泡5分鐘。③升汞的滲透力弱，一般浸泡10分鐘左右，對植物材料的殺傷力不大。④漂白粉容易導緻植物材料失綠，所以對于幼嫩材料要慎用。⑤在消毒液中加入濃度為0.08~0.12%的吐溫20或80(一種濕潤劑)，可以降低植物材料表面的張力，達到更好的消毒效果。

培養特點

1、培養條件可以人為控制

組培采用的植物材料完全是在人為提供的培養基和小氣候環境條件下進行生長，擺脫了大自然中四季、晝夜的變化以及災害性氣候的不利影響，且條件均一，對植物生長極為有利，便于穩定地進行周年培養生産。

2、生長周期短，繁殖率高

組培是由于人為控制培養條件，根據不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培養條件，因此生長較快。另外，植株也比較小，往往20~30天為一個周期。所以，雖然組培需要一定設備及能源消耗，但由于植物材料能按幾何級數繁殖生産，故總體來說成本低廉，且能及時提供規格一緻的優質種苗或脫病毒種苗。

3、管理方便，利于工廠化生産和自動化控制

植物組織培養是在一定的場所和環境下，人為提供一定的溫度、光照、濕度、營養、激素等條件，極利于高度集約化和高密度工廠化生産，也利于自動化控制生産。它是未來農業工廠化育苗的發展方向。它與盆栽、田間栽培等相比省去了中耕除草、澆水施肥、防治病蟲等一系列繁雜勞動，可以大大節省人力、物力及田間種植所需要的土地。

文章來源：每日生物評論

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