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為什麼一般選用堿性染料

生活 更新时间:2024-10-16 01:17:18

高中生物學課本在描述染色質時指出:染色質(體)容易被堿性染料染成深色。實驗中對染色質(體)進行染色,須使用龍膽紫溶液或醋酸洋紅溶液等堿性染色劑,這些染色劑是以龍膽紫或洋紅溶解于醋酸溶液中制得,配制後的龍膽紫溶液pH值約小于7(呈酸性)。那麼為什麼把龍膽紫溶液稱為堿性染色劑呢?

一、堿性染料對染色體染色的原理

細胞核中的染色質(體)内含有脫氧核糖核酸(即DNA),屬酸性物質,可電離出H,而使自身帶負電荷,所以它能與堿性染料(如龍膽紫)電離出的帶正電荷的助色基團通過電荷間的引力作用牢固結合,從而被染料染上顔色。在“植物細胞有絲分裂的觀察”實驗中,若用鹽酸解離後不漂洗直接染色,則由于鹽酸是一種強酸,而脫氧核糖核酸是一種弱酸,鹽酸的存在會抑制脫氧核糖核酸的電離,從而使脫氧核糖核酸無法與龍膽紫中帶正電荷的助色基團結合,這樣染色質就無法被染上顔色。

二、堿性染料和酸性染料

1、作為染色劑必須具備兩個條件:

一是具有顔色;産生顔色的部分稱為發色基團

2、堿性(或酸性)染色劑的界定并非由染料溶液的pH值決定的,而是根據染料物質中助色基團電離後所帶的電荷來決定的。

助色基團帶正電荷的染色劑為堿性染色劑(又稱陽離子染料)

助色基團帶負電荷的染色劑為酸性染色劑(又稱陰離子染料)

3、高中階段涉及的堿性染料主要有兩種:龍膽紫、醋酸洋紅,其染料本身的PH值呈酸性。

從配制方法上看。龍膽紫染液的配制過程:取龍膽紫溶解在2%乙酸溶液,直到溶液不變成深紫色為止;醋酸洋紅的配制過程:取100mlA5%乙酸,煮沸30s,加入1g洋紅,攪拌,再煮2~這兩種堿性染料的配制過程中用到的溶劑都是乙酸。

龍膽紫PH值:3.0-5.0 醋酸洋紅PH值:1.9

三、其他堿性染料

生物學常見的堿性染料有:龍膽紫、醋酸洋紅、蘇木精、甲基綠、吡羅紅等等

高中實驗《觀察細胞内DNA和RNA的分布》,利用甲基綠和吡羅紅的混合染色劑對細胞進行染色,甲基綠将DNA染成綠色而吡羅紅将RNA染成紅色,以觀察DNA和RNA在細胞内的分布情況。

四、蘇木精-伊紅染色法(簡稱HE染色法)

蘇木精為堿性染料,主要使細胞核内的染色質與胞質内的核酸着紫藍色。

伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分着紅色

為什麼一般選用堿性染料(什麼是堿性染料)1

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