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飲用水中大腸杆菌檢測方法是什麼

健康更新时间:2025-01-10 14:53:14

　　大腸杆菌是比較常見的細菌，對于人體是有害的，常見于我們的飲用水當中，要是長時間的飲用含有大腸杆菌的水的話，對于身體的傷害是很大的。對此，要檢查水中的大腸杆菌。那飲用水中大腸杆菌檢測方法是什麼？這個問題，很多的朋友都很好奇，下面就為大家簡單的介紹一下。

　　飲用水中大腸杆菌檢測方法是什麼？

　　1、飲用水中大腸杆菌快速檢測方法，其特征在于包括以下步驟：

　　(1)水樣中微生物的收集及其DNA的提取：采用滅菌後的濾膜或濾器過濾水樣，在裝有無菌水的EP管中，洗滌濾膜，離心，棄上清液，備用;

　　(2)水樣中微生物DNA的提取： A、向EP管中加入TE緩沖液，使之重懸; B、加入SDS和蛋白酶K，混勻，溫育45min～1h; C、加入氯仿/異戊醇，混勻，離心，将上清液轉入一個新EP管中; D、加入等體積的酚/氯仿/異戊醇，混勻，離心，将上清液轉入一個新EP管中; E、加入異丙醇，輕輕混合直到DNA沉澱下來，離心; F、棄上清，沉澱物用乙醇洗滌，晾幹; G、将沉澱重溶于TE緩沖液，搖勻; H、用紫外分光光度計測定提取的基因組DNA模闆的0D值，計算其DNA濃度，計算方法為： DNA濃度(μg/μL)=OD值260nm×樣品稀釋倍數×50/1000 I、将基因組DNA模闆做好标記，貯存，備用;

　　(3)PCR擴增; 反應引物：上遊引物：5’-tgttcagtggcaagagtt-3’ 下遊引物：5’-taatcgatatacccgctc-3’ 50μL反應體系： 10×PCR緩沖液5μL Tag酶2U/μL1μL MgCl2(25mM)5μL dNTP(2.5MM)5μL ddH2029μL 上遊引物10μM2μL 上遊引物10μM2μL 模闆DNA1.5μg/μL1μL

　　(4)産物觀察： A、凝膠的準備：先配置瓊脂糖溶液，加熱，使其充分溶解，再加入溴化乙錠溶液; B、配置TAE電泳液; C、倒膠：将配置好的瓊脂糖溶液倒入膠闆中，待其凝固後，放入電泳槽中; D、電泳：将擴增好的PCR産物與緩沖液按比例混合，加入到凝膠加樣孔中，同時加入 DNA分子量标準，接通電源，設定電壓和電流，開始電泳。 E、觀察;将擴增産物在紫外光下觀察，拍攝圖片。

　　上文就是關于飲用水中大腸杆菌檢測方法是什麼的介紹，現在大家了解了吧！其實可要我們不喝生水，飲用經過燒開的水，就沒有這些問題了。這就是為什麼總是提倡大家和涼開水的原因。而且多喝涼開水對身體是很有好處的，無論是男女老少。

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