抑郁動物模型的造模方法找不對？

實驗動物不會選擇？

不知道有哪些常用的行為學檢測方法？

「全線賦能“沃”的實驗」之實驗方法實戰教程

直播第二期将為大家帶來

《抑郁動物模型研究方法》

兩位老師為大家詳細講解

造模方法、實驗動物選擇、行為學檢測方法

涵蓋常用模型和高頻技巧，更有互動答疑

快速幫你摸清抑郁動物模型的構建

直播時間

4月26日（周二）19：00

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上期不少小夥伴在直播間

提出互動問題，這次我們全部講解

一、實驗操作類

1.注射針進入目标腦區後，可以直接進行注射嗎？

“确定針頭到達目标腦區後，建議停針1min，平衡氣壓，然後就可以開啟注射程序了。”

2.顱釘植入的位置如何選擇？

“顱釘的植入位置應該盡量避免血管集中的區域及注射位點。”

3.顱骨調平的标準要求是？

“前囟和後囟高度差，Bregma左右高度差均在±0.03mm以内，即可認為與顱骨水平。”

4.小鼠腦部病毒注射實驗需要挑開硬腦膜嗎？

“使用較細的玻璃電極注射的時候需要挑開硬腦膜，因為電極尖端較為脆弱，而硬腦膜具有彈性阻力，可能會把尖端弄斷。同樣道理，在植入多通道電極的時，也需要挑開硬腦膜，防止電極尖端受損。”

5.腦部病毒注射實驗中，進針速度需要控制在？

“進針應保持勻速緩慢，推薦将全自動腦立體定位儀的速度設置在0.2-0.5mm/s。”

6.使用腦立體定位儀固定小鼠，耳杆固定位置是？

“一側耳杆移至适當位置旋緊固定，用手輕柔拖住老鼠頭部，将頭部同側枕骨大孔位置對準耳杆尖端，緩慢推動另一側耳杆至枕骨大孔處。”

7.如何判斷病毒正常注射，沒有産生針頭堵塞等現象？

“在使用注射針連接玻璃電極進行病毒注射時，可以先用空針吸取足夠的礦物油起到密封作用，再吸取一定體積的病毒，礦物油的重力作用可以保證病毒注射更為流暢。另外礦物油與病毒之間因為密度不同會出現明顯的液面分界線，我們可以用記号筆标記分界線的位置，就可以很直觀觀察到注射過程中是否存在針頭阻塞現象了。”

二、實驗耗材類

1.腦立體定位手術中，如何保護小鼠眼睛不受光源傷害？

“固定小鼠之後，可以在小鼠眼周塗抹紅黴素眼膏，起到一定的閉光和防感染作用。”

2.光遺傳與光纖記錄使用的陶瓷插針有區别嗎？

“目前常見的陶瓷插針都是使用的石英材質，自發熒光較低，所以可用于光遺傳和光纖記錄實驗。但是光纖記錄實驗更推薦使用黑色陶瓷插針，可以更好的避免環境光對于信号的幹擾。”

3.固定的顱釘需要使用多大尺寸？什麼材質？

“小鼠用M1.0，大鼠用M1.4，M1.2介于兩者之間，成年小鼠與幼大鼠可用，一般是不鏽鋼材質。”

4.顱釘的作用是？

“如同蓋房子使用的鋼筋一樣，和牙科水泥一起可以讓植入的陶瓷插針等更加牢固。”

三、實驗技巧類

1.左右顱骨調平需要旁開多少距離？

“依據個人習慣而定，一般推薦旁開2mm左右（2-2.5mm均可）。”

2.使用牙科水泥固定，是否還需要縫合頭皮組織？

“如果備皮環節直接将注射位點上方的頭皮直接剪掉，那麼直接通過牙科水泥就可以覆蓋頭部整體創面，不需要在縫合頭皮。如果是剪開頭皮進行的注射，或者牙科水泥固定的範圍較小，可以将周邊的頭皮進行縫合。”

3．病毒注射完成後，植入陶瓷插針需要重新進行顱骨調平嗎？

“在實驗中一般不需要二次調平，使用前囟點作為參考0點，那麼整體操作過程中就始終保持同一個參考點即可。如果發現更換夾持器或者更換實驗器材，導緻坐标有較大差别，可能是動物固定不夠牢固，需要重新檢查固定。”

4.光纖記錄實驗過程中需要全程避光嗎？

“當然不建議強光下進行實驗，使用黑色陶瓷插針及黑色陶瓷套管，将動物頭部的牙科水泥塗黑即可很好的避免環境光對于實驗信号的幹擾。同時實驗環境前後需要保持一緻，避免環境變化導緻的數據對比問題。”

5.怎樣才能讓數據結果更加平滑？

“數據處理過程中可以選擇平滑處理功能，同時在數據采集過程中，可以改變相應的參數（如幀率，曝光等）可以讓數據呈現的更加好看。”

6.光纖記錄中進行光纖漂白的目的是？

“光纖具有一定的自發熒光，這種内部的自發熒光會掩蓋一部分微弱的信号。常用光纖根據材質分為普通光纖和低自發熒光光纖，普通光纖進行光纖記錄實驗前必須進行漂白。”

7.本底信号波動的産生原因？

“實驗環境的不穩定（溫度，光線等），動物狀态都有可能導緻本底信号波動。使用黑色陶瓷插針及黑色陶瓷套管，将動物頭部的牙科水泥塗黑可以很好的避免環境光對于實驗信号的幹擾。”

8.神經遞質探針信号與鈣信号有什麼差别？

“常見鈣信号會呈現出快速上升和緩慢下降的特征峰形，而遞質類信号因為信号周期較長，上升或下降都可能需要較長的時間，所以信号較為平緩。但是不同腦區及種類細胞的鈣信号差别較大，具體實驗會有不同。（參考下面圖片——經典鈣信号狀态）。”

四、實驗儀器類

1.光纖記錄數據分析軟件需要單獨安裝嗎？

“不需要，R820光纖記錄軟件包含數據采集功能和數據分析功能，通過一個軟件即可實現采集和分析，簡化實驗步驟，提高實驗效率。”

2.夾持玻璃電極的注射儀器是？

“R480玻璃微電極注射泵，可用于細胞、胚胎、顱腦等納升級顯微注射。”

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