我國首次發生非洲豬瘟（ASF），很多檢測方法都是參考OIE标準。OIE所推薦的實驗室診斷方法包括幾種。

第一，病毒分離，這種方法僅局限于參考實驗室使用，或者是在一些專業實驗室、能夠分毒的實驗室進行确診，一旦分離到非洲豬瘟病毒（ASFV）可以進行後續很多細節性研究。

第二，進行病原檢測，包括抗原或者核酸檢測，使用免疫熒光方法，或者使用雙夾心ELISA方法，或者是現在國内使用最多的PCR檢核酸的方法來檢測ASFV，一般采全血或脾、淋巴結、扁桃體和腎髒等高病毒含量的組織和髒器。還有膠體金試條、雙夾心ELISA、LAMP、微流控芯片等檢測方法。

第三，抗體檢測。前面已經說過抗體是“雁過留痕”，如果感染後，一般情況下在7～10天會産生抗體，而且抗體持續時間長，這樣的話，我們檢測的窗口期時間更長，在後期也可以更方便的檢出，所以檢測血清組織液或者唾液也可以，一般情況下是采用ELISA或試紙條進行檢測。

病毒分離的方法可以分離到活病毒，但是程序要求比較苛刻，且時間長，不适合推廣。雙夾心ELISA最大的優點是可以做大的、高通量的檢測，它檢測的是病毒抗原。膠體金試紙條、免疫熒光方法也是檢測病毒抗原。檢測病毒抗體的，主要是ELISA、IFA/FAT以及膠體金試紙條。PCR方法，主要是用來檢測病毒遺傳物質（DNA）。測序，可以作為一個非常重要的分析親緣性、溯源、基因分型的方法。

實時定量熒光PCR的優勢，一是特異性好，二是敏感性高。但是成本高、容易出現污染導緻的假陽性。一旦樣品檢測足夠多，在核酸産物大量存在的情況下，污染導緻假陽性的風險就非常高。所以，要想做好一個标準的PCR檢測，從實驗室的設計開始就應該做好實驗分區，同時做好污染核酸的清除。再者，出現假陰性，相當于漏檢。原因很多，譬如操作失誤，可能忘記加酶或者PCR條件設置不對，或者是程序出問題等，應該嚴格做好對照，帶陽性對照（從DNA提取開始）；第2種可能，采樣不确實或樣品降解，建議設置帶内參的PCR方法；第3種，就是有可能樣品中有PCR抑制因子，檢測臘肉或者一些處理過的加工食品的時候尤其要注意，樣品中是不是有可對PCR進行抑制的成分，譬如季铵鹽，EDTA，乙醇、脂肪、酚、多糖、一些高濃度蛋白質、SDS和醋酸鈉等都是驗證過可對PCR擴增具有抑制活性的一些有機或者無機的成分，處理方法是設置帶内參的PCR方法，樣品倍比稀釋後再進行PCR檢測。

（資料來源：本文摘自中國農業大學動物醫學院副教授周磊老師，在2019年 “伊科拜克•豬兜講壇” 第4期（總第32期）直播節目中分享的内容。根據節目視頻整理，未經本人審閱，請以本人觀點為準。未經允許，請勿轉載。）

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