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市場上，常見豬用疫苗的類型大緻可以分為：全病毒滅活疫苗、減毒活疫苗、基因工程疫苗（包括亞單位疫苗、活載體疫苗、基因重組疫苗）等。亞單位疫苗作為基因工程疫苗的分支，以其安全、高效、可規模化生産等優勢逐步成為越來越多研究者關注的焦點。

一

什麼樣的疫苗是亞單位疫苗？

亞單位疫苗是通過化學分解或有控制性的蛋白質水解方法，提取細菌、病毒的特殊蛋白質結構，篩選出的具有免疫活性的片段制成的疫苗。

因為在大分子抗原攜帶的多種特異性的抗原決定簇中，隻有少量抗原部位對保護性免疫應答起作用。而亞單位疫苗是将緻病原主要的保護性免疫原存在的組分進行提取、提純、組裝等過程，篩選出的具有免疫活性的片段來制成的疫苗。

二

亞單位疫苗的特點有哪些？

1、相對全病毒疫苗來講，亞單位疫苗安全性更高，穩定性更好。

2、免疫具有持久性，一次接種可獲得長期免疫力，無需反複多次加強免疫。

3、亞單位疫苗可借助大腸杆菌、杆狀病毒、畢赤酵母為載體，可實現規模化生産。

4、亞單位疫苗不僅可以産生體液免疫應答，而且可以導緻細胞毒T淋巴細胞激活而誘導細胞免疫。

三

病毒樣顆粒圓環亞單位疫苗的研發情況

豬2型圓環病毒是近年來發現的一種DNA病毒，該侵略性病原可引起豬的一系列相關疾病（PCVAD），給世界範圍内的養豬業造成重大的經濟損失。随着科研的深入，研究者對PCV2疫苗做了深入的研究，未來安全、高效可規模化生産的新型基因工程疫苗逐步成為防控該病的主流。

圓環亞單位疫苗僅有幾種主要表面蛋白質，避免産生許多無關抗原誘發的抗體，從而減少疫苗的副反應和疫苗引起的相關疾病。Cap蛋白是PCV2病毒主要的結構蛋白，具有很強的免疫原性，可刺激機體産生特異性的免疫保護，是基因工程疫苗研制的重要靶蛋白，目前國内在售的PCV2基因工程亞單位疫苗基本都和Cap蛋白相關。

将Cap蛋白的表達基因植入不同載體中，通過不同載體表達系統獲得大量的Cap蛋白，這樣就獲得了組裝圓環病毒VLPs的基本原料。然後通過組裝等工作制成完整的病毒樣顆粒，便成了我們所需要的病毒樣顆粒圓環亞單位疫苗。

普萊柯公司病毒樣顆粒圓環亞單位疫苗技術突破

亞單位疫苗作為一種新型的疫苗，在疫病防控、豬場淨化等方面會起到越來越重要的作用，也将成為未來疫病防控和淨化的首選疫苗。普萊柯公司自2010 年上市國内首創全病毒豬圓環病毒2型滅活疫苗（SH株）之後，長期緻力于更高品質圓環系列産品的研究與開發，主要技術突破如下：

1、可溶性蛋白的獲取

大腸杆菌表達系統因其自身衆多的優點而成為表達外源性蛋白的首選，但是有些情況下，外源性蛋白在大腸杆菌表達過程中，因表達過快不能正确折疊而形成不溶的無活性蛋白，即包涵體。如何提高活性蛋白的獲取量，專家們進行了深入的研究，在豐富的大腸杆菌表達技術儲備和完善的載體庫與基因庫基礎上。通過生物信息學統計分析和基因重組克隆技術構建、優化和篩選表達載體。實現該技術的突破，有效的提高可溶性蛋白的表達量，減少無活性蛋白的生成。

2、高純度Cap蛋白獲取

在Cap蛋白的獲取中，Cap蛋白生成過程中會産生大量的無效蛋白，我們稱之為雜蛋白，雜蛋白會影響病毒樣顆粒的形成，同時會影響疫苗的免疫效力。去除雜蛋白是做好疫苗的首要難點之一。國家獸用藥品工程技術研究中心多位專家經過多重蛋白層析技術，獲得高純度的Cap蛋白，将Cap蛋白的純度提高至95%以上，從而獲得了組裝有效病毒樣顆粒的原料。

3、病毒樣顆粒組裝

獲得了最基本的原料，如何将Cap蛋白組裝成有效的病毒樣粒子是核心技術。在以前的研究中，該難點是很多學者難以逾越的技術屏障。因為組裝不成，疫苗中含的将是大量的單一的Cap蛋白，即使含量再高，也無法産生很高的抗體，對豬隻無法進行高效的保護。國家獸用藥品工程技術研究中心與新加坡國立大學經過長期的技術攻關，通過切向流超濾等技術實現組裝，将近100%的蛋白都組裝成病毒樣顆粒。通過投射電鏡，我們可以看到組裝成VLPs的真實面目。

蛋白純化後，顆粒組裝

顆粒組裝

基于此，普萊柯公司成功研發國内首個純病毒樣顆粒基因工程圓環亞單位疫苗，新産品即将上市， 給養殖業健康發展做出新的貢獻，同時也将推出關于圓環病毒疫苗的實驗室及田間科學的評價手段及方法，敬請關注下一期微信報道！

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