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顯微鏡的物鏡孔徑數怎麼求

生活 更新时间:2024-07-02 06:26:03

顯微鏡的物鏡孔徑數怎麼求?光學顯微鏡最關鍵的零件就是物鏡,也是最難設計和裝配的零件,物鏡是由一些列透鏡組裝而成,負責将樣品發出的光彙聚後經過目鏡進行成像,是光從樣品傳輸到相面所經過的第一個傳輸元件,最接近物體,也因此得名——物鏡物鏡鏡筒上都會印有一些代表物鏡信息的标識,今天我們一起了解一下物鏡标識所代表的含義,我來為大家科普一下關于顯微鏡的物鏡孔徑數怎麼求?下面希望有你要的答案,我們一起來看看吧!

顯微鏡的物鏡孔徑數怎麼求(聊聊顯微物鏡的有關知識)1

顯微鏡的物鏡孔徑數怎麼求

光學顯微鏡最關鍵的零件就是物鏡,也是最難設計和裝配的零件,物鏡是由一些列透鏡組裝而成,負責将樣品發出的光彙聚後經過目鏡進行成像,是光從樣品傳輸到相面所經過的第一個傳輸元件,最接近物體,也因此得名——物鏡。物鏡鏡筒上都會印有一些代表物鏡信息的标識,今天我們一起了解一下物鏡标識所代表的含義。

1.生産廠家:好一點的商業物鏡上都會有生廠廠家的字樣,比如ZEISS、LEICA、Nikon、OLYMPUS等,都是常見的顯微物鏡制造商,物鏡品質也相對較好。

2.物鏡校正因子:在生産廠家的下面,會有一些英文字母,Plan、APO、Fluor等,許多初識物鏡者不能很好的理解這些字母的含義,這些字母是物鏡設計時對像差的矯正級别标識,也包括使用場景(比如用于紅外、紫外等不同波長),值得一提的是不同廠家對于不同标準的寫法會有區别,但本質代表着物鏡的設計标準,感興趣的可以自行查閱。光學透鏡成像經常涉及到球差、慧差、像散、場曲、畸變、色差等像差,矯正這些像差對含有多個透鏡的顯微物鏡尤為關鍵,根據矯正程度大緻分為以下幾個級别,如圖,顯微物鏡的銘牌上會标注這些矯正信息,物鏡價格也會随着矯正級别的增加而顯著增加。

消色差物鏡(Achromatic Objective):是實驗室常用的物鏡,消色差物鏡針對藍光(486nm)和紅光(656nm)兩種波長進行垂軸色差矯正,同時也對546nm波長的光進行球差矯正。

平場消色差物鏡(Plan Achromatic Objective):消色差物鏡并沒有進行場曲矯正,平場消色差物鏡則是對消色差物鏡進行場曲矯正,使得曲面場變成平面。

螢石物鏡(Fluorite Objective):以一種礦物螢石命名,也稱為半複消色差透鏡(Semi-apochromats),相比消色差物鏡,對更多波長進行色差、球差的矯正,也具有更好的成像質量。

平場螢石物鏡(Plan Fluorite Objective)同樣平場螢石物鏡沒有進行場曲矯正,針對螢石物鏡進行場曲矯正,更好的提升成像質量。

平場複消色差物鏡(Plan Apochromatic) 對更多顔色的光進行色差、球差矯正,幾乎消除色差,複消色差透鏡都是帶了場曲矯正,是白光成像的最佳選擇。

在這着重講一下場曲矯正,想要矯正場曲像差,需要在光學設計上增加相當多的光學透鏡,如圖所示為消色差透鏡和平場消色差透鏡的光學結構對比,透鏡多物鏡的制作成本自然會升高,但場曲矯正在高端物鏡設計中是十分必要的,尤其對于複消色差物鏡。

3.放大倍率:物鏡上會标有放大倍率:10X、20X、50X、100X等,放大倍率是我們選擇顯微物鏡時主要考慮因素之一,但我們買的物鏡上标有50X,在我們使用中真的就放大50倍嗎?

實際上物鏡的放大倍率取決于鏡筒透鏡和物鏡的焦距,公式如下:

不同廠商的物鏡是根據自己的顯微鏡設計的,因此隻有用在自己的顯微鏡上才是标注的放大倍率。那如果把物鏡應用在其他顯微鏡或者自制顯微鏡上呢?每個廠家的顯微鏡鏡筒透鏡焦距是固定的,如下圖:

根據公式我們可以計算出不同廠家物鏡的焦距,在根據你所使用的顯微鏡的鏡筒透鏡焦距,可以計算出放大倍率。比如Nikon50X物鏡的焦距為200/50=4mm,如果應用在Olympus顯微鏡上,則放大倍率為180/4=45X。

4.數值孔徑:數值孔徑(Numerical Aperture,NA)是顯微物鏡的重要參數,是焦距與入瞳直徑的函數:

顯微物鏡的光學分辨率Resolution = λ/2n(sin(θ)),可将NA決定着顯微鏡的分辨率,NA值越大,其分辨率越高,NA中的n指的是工作介質的折射率,空氣中n=1,θ不超過90°,因此空氣介質中的NA最大不超過1,若想提升NA,可以更換介質,比如浸潤在油中。

5.蓋玻片厚度:有些生物顯微鏡在使用時需要在樣品上蓋一個蓋玻片其厚度通常為0.17mm,針對這種應用的顯微物鏡在設計時就考慮到這0.17mm的距離矯正,其銘牌上也會标注,如圖所示。

6.有限遠共轭&無限遠共轭:這裡的有限遠、無限遠共轭指的是物面與像面這兩個共轭面而言的,有限遠共轭顯微物鏡:從樣品散射的光被物鏡彙集到一點,然後通過目鏡成像,有限共轭顯微鏡有兩個标準DIN(Deutsceh Industrie Norm)、JIS(JapaneseIndustrial Standard),如圖所示。對于這兩種标準的顯微鏡,有幾個長度需要注意,機械筒長(MechanicalTube Length, MTL)、光學筒長(Optical Tube Length, OTL)、齊焦距(Parfocal Distance)。關于這三個長度的定義如下:

機械筒長:從物鏡安裝面到目鏡安裝面的距離,即物鏡凸緣到目鏡凸緣的距離。

光學筒長:從物鏡後焦面到中間像面的距離。

齊焦距:從物鏡安裝面(物鏡凸緣)到觀察物體所在平面的距離。

這兩種标準物鏡的安裝螺紋規格都是RMS(0.7965" x 36TPI)

無限遠共轭顯微物鏡:從樣品散射出的光經過物鏡後呈平行光束,通過在物鏡與目鏡之間加一個管透鏡來成中間像,這種現代的顯微鏡設計方式較傳統顯微鏡設計多了一個透鏡,但卻使得顯微鏡的配置更加靈活,及時物鏡與管透鏡之間的距離變化,也不改變放大倍率,不受之前的距離限制,方便在顯微鏡中擴展熒光等成像模塊以及濾光片等,現在顯微鏡系統多采用無限遠共轭顯微鏡。

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