用高效液相色譜法檢測水中萘酚含量的原理是将一定量酸化後的樣品（pH=1-2），用 C18固相萃取柱萃取，甲醇洗脫，洗脫液中的萘酚經液相色譜分離後，用熒光檢測器檢測。根據保留時間定性，外标法定量。此方法可以用于地表水、生活污水、工業廢水中的萘酚測定，當取樣體積為50ml，洗脫液體積為10.0ml，進樣體積為10.0ul時，在發射波長425nm處，本方法測定1-萘酚和2-萘酚的方法檢出限均為0.3ug/L，測定下限均為1.2ug/L；在發射波長360nm處，本方法測定2-萘酚的方法檢出限為0.06ug/L，測定下限為0.24ug/L。

1.乙腈（CH3CN）：液相色譜純。

2.甲醇（CH3OH）：液相色譜純。

3.鹽酸：ρ（HCl）=1.18g/ml。

4.抗壞血酸（C6H8O6）。

5.1-萘酚：w（C10H7OH）≥99.5%。

6.萘酚混合标準貯備液：ρ≈1000mg/L。

分别稱取0.10g（準确至0.0001g）1-萘酚和2-萘酚于100 ml燒杯中，加入100mg抗壞血酸（5.4），用少量甲醇（5.2）溶解，轉移至100 ml容量瓶中，用甲醇稀釋至标線，混勻。分裝于棕色樣品瓶中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存3個月。

也可購買市售有證标準溶液，按标準溶液證書要求保存。

8.萘酚混合标準使用液Ⅰ：ρ=100 mg/L；

量取适量萘酚混合标準貯備液于10 ml容量瓶中，用甲醇定容，混勻。分裝于棕色樣品瓶中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存3個月。

9.萘酚混合标準使用液Ⅱ：ρ=10.0 mg/L；

量取1.00 ml萘酚混合标準使用液Ⅰ（5.8）于10 ml容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，混勻。于棕色樣品瓶中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存3個月。

10.鹽酸溶液1 1。

11.鹽酸溶液：c=0.01mol/L。

量取1.8ml鹽酸溶液，用水稀釋至1000ml。

12.固相萃取柱C18：填料為十八烷基鍵合矽膠，500mg/6ml。

13. 微孔濾膜：0.45um，有機相。

1. 高效液相色譜儀：配有多通道熒光檢測器。

2.色譜柱：250 mm（長）×4.6 mm（内徑）×5 µm（粒徑），填料為十八烷基鍵合矽膠（C18）或其他等效液相色譜柱。

3.棕色采樣瓶：250ml 或 500 ml 帶聚四氟乙烯襯墊的螺旋蓋玻璃瓶或磨口瓶。

4.棕色樣品瓶：2 ml、10 ml 或 50 ml 帶聚四氟乙烯襯墊的螺旋蓋玻璃瓶。

5.氣密性玻璃注射器：5 ml 或 10 ml，與微孔濾膜（5.13）配合使用。

6.固相萃取裝置。

将C18固相萃取柱固定在固相萃取裝置上，依次用9ml甲醇和9ml鹽酸溶液活化固相萃取柱，始終保持柱頭浸潤。将樣品平衡至室溫，搖勻，量取10.0 ml-50.0ml樣品（可根據樣品中目标化合物含量，适當增加或減少取樣量）于樣品瓶中，然後使樣品以3-4 ml/min流速通過萃取柱。在柱填料剛好暴露于空氣之前，用5ml水，分2次沖洗樣品瓶，洗滌液一并轉移至柱上，棄去流出液，加壓擠出或抽幹萃取柱中的水分。用10.0ml甲醇洗脫，接收洗脫液，待初始洗脫液流出後，關閉活塞，浸泡固相萃取柱至少5min。打開活塞，收集全部洗脫液于10ml棕色樣品瓶中，搖勻，用微孔濾膜過濾，待測。

流動相：乙腈/水（含0.2%甲醇）=47/53；流量：1.2ml/min；進樣體積：10.0ul；

柱溫：35℃；檢測器：熒光檢測器；激發波長：228 nm；

發射波長：同時測定1-萘酚和2-萘酚時，選425nm、435nm 或450nm；隻測定2-萘酚時，選360nm、350nm。将其中一個波長作為檢測波長，另一個作為輔助定性波長。

分别取适量萘酚标準使用液Ⅱ或标準使用液Ⅰ于10ml 棕色容量瓶中，以甲醇定容，配制能覆蓋水樣濃度範圍的至少包含5個濃度點的标準系列。标準系列溶液配制及其參考濃度見溶液配制及其參考濃度表。

按照儀器參考條件，由低濃度到高濃度對标準系列溶液依次進樣，分離、檢測目标化合物，記錄保留時間和峰高。以各标準系列溶液中目标化合物的質量濃度（ug/L）為橫坐标，以其對應的峰高為縱坐标，建立标準曲線。

準備好的水樣可以按照标準曲線建立中相同的儀器條件，按照水樣的制備步驟進行檢測。

根據保留時間定性，也可根據試樣中目标化合物在不同發射波長下的峰高比與标準水樣比較（其相對偏差應≤5%）輔助定性。必要時，可用液相色譜-質譜法确認。

用外标法定量。試樣中目标化合物的響應值不應超過标準曲線的上限。否則，應将水樣适當稀釋後再萃取或适當減少取樣量，計算時乘以稀釋倍數。

最後通過相應的計算公式得出結果。

1.水樣中的萘胺類等堿性有機化合物，在酸性條件下（pH=1～2）固相萃取，以鹽離子的形式存在于水相中，不被 C18固相萃取柱吸附，不幹擾萘酚的測定。

2.水樣中的多環芳烴類，在本标準規定的條件下，其響應值很低，一般情況下不會幹擾萘酚的測定。

3.其他在熒光檢測器上有響應的酸性和中性有機化合物可能會幹擾萘酚的測定，可通過改變流動相的比例改善分離度，也可選擇在相對無幹擾的檢測波長下測定避免幹擾。

4.為避免固相萃取柱穿透，水樣中目标化合物總含量一般不應超過200µg。否則，應将水樣适當稀釋後再萃取或适當減少取樣量。

5.對于基體複雜、有機物含量未知的水樣，為避免穿透，可以分别用兩根固相萃取柱萃取不同體積的同一個水樣。例如分别萃取10.0ml 和20.0ml，當後者的測定結果低于前者的20%時，即說明後者的吸附容量已達到飽和，需适當減少取樣量或将水樣稀釋後再固相萃取。

6.對于清潔的水樣，也可用微孔濾膜過濾後，直接進樣。

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