無菌間是微生物實驗的重要環節，關系到實驗結果的準确性，無菌間的使用規範要嚴格要求，保證實驗環境影響因素降到最低。
使用要求：
1、無菌間在使用前，必須先進行清理、臭氧殺菌時間50min或紫外燈殺菌30min。
2、檢測使用的器皿、樣品等物品的進出，通過緩沖窗進行傳遞，使用完畢後紫外燈殺菌30min，開傳遞窗時禁止兩邊同時打開。
3、檢測人員進入緩沖間後，先更換拖鞋、佩帶無菌帽和一次性口罩，更換衣服，并将其擺放整齊，方可進入無菌間。
4、進入無菌室過程中，依次打開和關閉各緩沖間的門，以避免空氣流通帶入外界的雜菌。
5、無菌操作前必須使用75%酒精對手部進行消毒，接種有害菌種時必須戴手套。
6、進行接種所用的吸管，平皿及培養基等必須經嚴格消毒滅菌，打開包裝未使用完的器皿，不能放置後再使用，金屬用具應高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼後使用，剪刀、鑷子至少每周進行一次高壓滅菌。
7、從包裝中取出吸管時，吸管尖部不能觸及外露部位，使用吸管接種于試管或平皿時，吸管尖不得觸及試管或平皿邊。
8、接種樣品、轉種細菌必須在酒精燈前操作，接種細菌或樣品時，吸管從包裝中取出後及打開試管塞都要通過火焰消毒。
9、接種環或針在接種細菌前應經火焰燒灼全部金屬絲，必要時還要燒到環和針與杆的連接處，接種結核菌和烈性菌的接種環應在沸水中煮沸5min，再經火焰燒灼。
10、吸管吸取菌液或樣品時，應用相應的橡皮頭吸取，不得直接用口吸。
11、檢驗結束後，所有帶菌的培養基、試劑、稀釋液和器皿必須盡快清理出無菌間滅菌洗刷。
12、檢驗結束後，人員離開無菌間前，須将無菌間的衛生徹底清理、并用紫外燈進行殺菌。
13、無菌間所用工器具（剪刀、鑷子、膠頭、塗抹棒、托盤盒等）使用完畢後，擺放整齊。
14、滅菌後的無菌間懸挂“已滅菌”标識，正在使用的無菌間要懸挂“使用中”标識。防止檢測人員在未經過滅菌的無菌間中進行微生物檢測。
其它注意事項：
1. 禁止在無菌間内打手機，由于業務需要可在緩沖間内打手機。
2. 實驗過程中穿着整齊，不要出現露頭發、鼻孔等現象，禁止在無菌間打鬧、喧嘩。
3. 實驗過程中，物品要擺放整齊，實驗産生的垃圾要單獨存放不要亂放，防止污染實驗樣品。
4. 紫外燈每周五打掃衛生時要用酒精棉球擦拭，防止灰塵阻擋影響殺菌效果。
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