01

ABO血型分類

A: 紅細胞中含A抗原、血清中含抗B抗體

B: 紅細胞中含B抗原、血清中含抗A抗體

AB:紅細胞中含A抗原、B抗原血清中無抗體

O：紅細胞中無抗原、血清中含抗A和抗B抗體

02

ABO血型檢測原理

血型抗原與相應抗體在反應介質中形成紅細胞和相應血型抗體結合的免疫複合物，出現肉眼可見的凝集現象。分為正向定型和反向定型。正向定型指已知的特異性抗體（标準血清）檢查紅細胞的未知抗原。反向定型指已知的血型的标準紅細胞檢查血清中的未知抗體。

ABO血型鑒定方法

1.鹽水介質法(salt medium test)

原理:根據IgM類抗體與紅細胞膜上特異性抗原能發生凝集反應。

正定型:已知血型抗體試劑 紅細胞

鑒定紅細胞上血型抗原

反定型:已知标準紅細胞 血清

鑒定血清中抗體

反應條件:生理鹽水介質，室溫，肉眼可見凝集反應。

平闆法，試管法，微孔闆法，試管離心法最可信賴。

應用: ABO血型定型、RhD抗原定型

(IgG IgM, IgM單克隆抗體)，交叉合血

結果判斷：

2.玻片法

實驗材料：

1)診斷用抗A及抗B單克隆抗體試劑各一支。

2)玻片、無菌刺血針、消毒用碘酒、酒精、無菌棉簽、牙簽，記号筆等。

實驗方法

1)取潔淨玻片一張用蠟筆分成兩半，分别标記A、B，然後A側滴一滴抗A抗體（藍色)，B側滴一滴抗B抗體（黃色)。

2）被檢者耳垂或手指用碘酒消毒，酒精脫碘并涼幹後，用刺血針刺血。

3）用牙簽刮取兩滴血液充分與兩種抗體混勻，即可觀察結果

實驗結果

血型鑒定結果

注意事項

1.A、B兩側不能混，否則結果不可靠。

2.無菌觀念：消毒按一定方向，以一點為中心，由内向外；注意酒精脫碘，否則損傷皮膚、色素沉着；酒精脫碘後，要晾幹，否則進針會有燒灼疼痛。

3.流式細胞技術

實驗步驟

（1）稀釋: 将待測血樣的紅細胞用生理鹽水稀釋成百分之五的紅細胞懸液。

（2）标記: 分裝各管分别等比加入熒光素标記抗體，避光放置15min待受檢紅細胞上的血 型抗原與相應熒光标記抗體結合後，用生理鹽水洗滌離心除去未結合抗體。

（3）檢測: 重懸後立即用流式細胞儀檢測與熒光标記抗體結合的紅細胞，通過軟件分析， 從而得到待測樣本的紅細胞血型。

優勢

• 在細胞分型方面具有速度快、靈敏度高、特異性好，檢測結果準确，重複性好的優點。
• 特别适合應用于ABO血型亞型的快速鑒定。
• 目前有研究指出流式細胞技術亦可通過分離孕婦血液中的胎兒紅細胞用于産前非侵入性胎兒血型檢測。

質量控制

1）标準血清

①要求:新鮮，在有效期内，效價高，凝集力強，嚴防污染。

②常用的抗血清有:人血清ABO血型抗體:穩定性高，已滅活補體。

人ABO血型單克隆抗體:穩定性較人血清抗體的穩定性2)被檢紅細胞

i)标本新鮮，嚴防污染。

ii)某些疾病出現假凝集，可加做自身血清和紅細胞，自身紅細胞和生理鹽水對照試驗及結合反定型結果進行鑒定。

iii)當疑有血漿成分幹擾血型鑒定時可用生理鹽水反複洗滌紅細胞以除幹擾。

3）試驗器材

i)器材清潔、幹燥、标記清楚。

ii)用試管法定型時，應同時進行正向和反向定型。須設置對照。

iii)紅細胞濃度按要求配置，紅細胞與相應抗體的比例适當。

iiii)弱A亞型和弱B亞型，肉眼判斷必同時須用顯微鏡複查。

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