不同濃度單過硫酸氫鉀複合鹽制劑對養殖池水中理化因子影響與殺菌效果相關性試驗觀察
文/圖華中農業大學陳昌福、武漢科研時代生物技術有限公司周鑫軍
摘要:采用由不同生産企業制備的10種單過硫酸氫鉀複合鹽片劑、顆粒劑和粉劑,按照不同濃度投放在養殖池水中以後,檢測養殖池水中溶氧量、pH和氧化還原電位等幾種理化因子和對可培養細菌殺滅狀況。結果證明供試單過硫酸氫鉀複合鹽制劑,投放到養殖水體中以後,其溶氧量、pH和氧化還原電位等幾種理化因子變化趨勢不盡相同,而且對養殖池水中可培養細菌的殺滅作用也不盡一緻。按照各種産品的說明書中規定的劑量不能顯示出對養殖水體中氧化還原電位的明顯改變和增加溶解氧含量以及可培養細菌的殺菌作用。試驗結果說明,正在我國水産養殖用物質市場上流通的的單過硫酸氫鉀複合鹽制劑,存在嚴重的質量參差不齊問題。
單過硫酸氫鉀複合鹽制劑是被不少水産相關人員賦予“改底、調水”等功能的一種合成複合鹽類物質,也是我國目前在水産養殖中使用量比較大的一類化學物質。單過硫酸氫鉀複合鹽制劑是一種無機過氧化物,也稱為過一硫酸氫鉀,它與硫酸氫鉀、硫酸鉀結合成三合鹽的形式存在。因此,将其稱之為單過硫酸氫鉀複合鹽制劑。
本試驗觀察了将定量的單過硫酸氫鉀複合鹽制劑投放在盛有養殖池水的容器中,通過檢測供試養殖池水中溶氧量、pH、氧化還原電位等理化因子的變化狀态,對養殖池水中可培養細菌數量以及水産養殖動物常見緻病菌殺滅狀況等指标,初步評價了将單過硫酸氫鉀複合鹽制劑投放在養殖水體中的“調水”功能。現将試驗結果報告如下。
1.材料和方法
1.1供試單過硫酸氫鉀複合鹽制劑的來源
在本次試驗中,選用由不同生産企業制備的10種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑片劑、顆粒劑和粉劑。全部供試制劑是從武漢市新洲區汪集鎮漁藥銷售點采購到的。包括由湖北省某公司生産的“Ⅰ号片劑”(單顆粒均重:1.38g,未标注主成分含量)、由湖北省某公司生産的“Ⅱ号片劑”(單顆粒均重:1.28g,含量:20.0%)、由重慶市某公司生産的“Ⅲ号片劑”(單顆粒均重:0.95g,未标注主成分含量)、由江蘇省某公司生産“Ⅳ号片劑”(單顆粒均重:0.86g,未标注主成分含量)、由廣東省某公司生産的“Ⅴ号片劑”(單顆粒均重:0.68g,含量:20.0%)、湖北省某公司生産的“Ⅵ号顆粒劑”(未标注主成分含量)、上海市某公司生産的“VII号粉劑”(含量:50.0%)。北京市某公司生産的“Ⅷ号片劑”(單顆粒均重:1.05g,未标注主成分含量)、内蒙古某公司生産的“Ⅸ号片劑”(單顆粒均重:0.86g,未标注主成分含量)和湖南省某公司生産的“Ⅹ号片劑”(單顆粒均重:1.25g,未标注主成分含量)。
1.2供試養殖池水來源與容器
用于本試驗的養殖池水,均為取自武漢市新洲區汪集鎮魚苗孵化場的養殖池同一取樣點相同深度的池水。将供試容器在養殖池塘水體中清洗幹淨後,供作本試驗中的盛裝養殖池水的容器。
在容量為500.0mL的玻璃燒杯中,每個玻璃燒杯中盛裝養殖池水400.0mL,供做單過硫酸氫鉀複合鹽制劑對養殖池水中可培養細菌殺滅效果的試驗(圖1)。在容量為250.0mL的
圖1,在玻璃燒杯(上圖)和三角瓶(下圖,滅菌)盛裝養殖池水的殺菌試驗狀況
玻璃三角瓶中,每個三角瓶中盛裝100.0mL養殖池水,經過高壓滅菌消毒後,供完成單過硫酸氫鉀複合鹽制劑在養殖池水中,對養殖魚類常見緻病菌殺滅效果試驗。全部試驗在27~28℃的室溫條件下實施。
1.3養殖魚類常見緻病菌培養及其菌液制備
将引起淡水魚類細菌性敗血症的病原菌嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila),接種在腦心浸液瓊脂(BHIA,Difco)培養基中,置于28℃的恒溫培養箱中培養24h後,采用滅菌生理鹽水分别洗下菌落,配置成107cfu/mL菌液濃度,置于4℃冰箱中備用。
1.4單過硫酸氫鉀複合鹽制劑殺菌試驗條件
将盛有養殖池水的玻璃燒杯和玻璃三角瓶,放置于無菌條件下。首先向每個盛有100.0mL養殖池水并經過高壓滅菌消毒後的三角瓶中,準确加入菌液濃度為1.0×107cells/mL的A.hydrophila活菌液0.5mL,搖動均勻後,繼續靜置15min後,備用。在未經過高壓滅菌的盛有400.0mL養殖池水的玻璃燒杯中,不做添加緻病菌的處理,備用。
向每一個玻璃燒杯和玻璃三角瓶中,分别加入定量的單過硫酸氫鉀複合鹽制劑,使玻璃燒杯和玻璃三角瓶中的單過硫酸氫鉀複合鹽制劑的濃度,分别達到5.00mg/L、25.00mg/L和50.00mg/。在向每個容器中添加完藥物後,用玻璃棒攪拌均勻,繼續在超淨工作台内靜置40.0min。另外,采取添加菌液而不加藥物和既不加菌液也不加藥物的玻璃三角瓶,分别作為有菌無藥和無菌無藥對照組。
1.5單過硫酸氫鉀複合鹽制劑對養殖池水中氧化還原電位影響的測定
在向每個盛有400.0mL養殖池水的玻璃燒杯中投放單過硫酸氫鉀複合鹽制劑的前後,在90min的時間内連續4次檢測其養殖池水的溶氧量、pH和氧化還原電位等部分理化性狀的變化狀況。
1.6殺菌效果判定
在無菌條件下,從每個玻璃燒杯和玻璃三角瓶中盛有養殖池水中取50.0μL水樣,均勻塗布在盛有BHIA培養基的平皿中,将塗好的培養皿置于在28℃恒溫培養箱中培養。從每個玻璃三角瓶中盛有經過高壓滅菌養殖池水中取50.0μL水樣,塗布在盛有BHIA培養基的平皿中(圖2),将塗布菌液的平皿置于在28℃恒溫培養箱中培養48h後,根據培養皿中的菌落數量判斷藥物的殺菌效果,即判定單過硫酸氫鉀複合鹽制劑的最小殺菌濃度(minimum bactericidal concentration,MBC)。
圖2,從三角瓶中盛裝滅菌養殖池水中采樣進行養殖魚類緻病菌的培養與檢測
2.結果
2.1單過硫酸氫鉀複合鹽制劑對養殖池水中溶氧量的影響
在投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑後,對養殖池水中溶氧量的檢測結果如表1所示。由表1所示内容可以看出,在向各個燒杯中投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑後,養殖養殖池水中溶氧量均出現不同程度地上升。但是,與對照組相比,上升幅度不明顯,與投放各種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑不同劑量的相關性也是不明顯的。
表1,不同種類與劑量單過硫酸氫鉀複合鹽制劑對養殖養殖池水中溶氧量的影響
2.2單過硫酸氫鉀複合鹽制劑對養殖養殖池水中pH的影響
在投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑後,對養殖養殖池水中pH的檢測結果如表2所示。由表2所示内容可以看出,在向各個燒杯中投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑後,養殖養殖池水中pH幾乎沒有出現變化。
表2,不同種類與劑量單過硫酸氫鉀複合鹽制劑對養殖養殖池水中pH的影響
2.3單過硫酸氫鉀複合鹽制劑對養殖養殖池水中氧化還原電位的影響
在投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑後,對養殖養殖池水中氧化還原電位的檢測結果如表3所示。由表3所示内容可以看出,在向各個燒杯中投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑後,養殖養殖池水中氧化還原電位沒有出現有明顯的規律性的變化。
表3,不同種類與劑量單過硫酸氫鉀複合鹽制劑對養殖養殖池水中氧化還原電位的影響
2.4單過硫酸氫鉀複合鹽制劑對養殖養殖池水可培養細菌的殺滅效果
在投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑後,對養殖養殖池水可培養細菌的檢測結果如圖3所示。由圖3可以看出,在向各個燒杯中投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑後,大多數種類的制劑沒有顯示出殺菌效果,隻是少數幾個種類的單過硫酸氫鉀複合鹽制劑在達到25.0mg/L的濃度時,顯示出對養殖池水中的可培養細菌和A.hydrophila有一定的殺菌效果。
圖3,各種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑對養殖池水中可培養細菌和嗜水氣單胞菌的殺滅效果
注:“C”表示養殖池水,“A”高壓滅菌養殖池水;“Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、VII、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ”表示不同種類的單過硫酸氫鉀複合鹽制劑;“1、2、3”分别表示5.0mg/L、25.0mg/L和50.0mg/L的濃度。
3.讨論
從查閱相關文獻資料中的介紹内容可知,單過硫酸氫鉀複合鹽制劑的确可能是特别适合在水産養殖中廣泛使用的水産養殖用物質。據稱這種物質溶于水體後可以釋放出活性氧[O],并通過産品攜帶的高能活化劑經由鍊式反應而産生各種高能量、高活性的小分子的自由基、新生态原子氧、氧自由基、羟基自由基(·OH)、硫酸自由基(SO4−·)等多種活性成分。因此,單過硫酸氫鉀複合鹽制劑較長時期以來,被人們譽為“高效氧化消毒劑”,認為這種産品是其具有廣泛殺滅微生物作用的,包括細菌、芽胞、病毒、真菌等給水水體及給水管網中耐氯性細菌的滅活等。
在本試驗研究中,将從市場上采購的由不同生産企業生産的10種單過硫酸氫鉀複合鹽片劑、顆粒劑和粉劑,在養殖池水中按照不同濃度投放在養殖池水中以後,檢測養殖池水中幾種理化因子和對可培養細菌殺滅狀況,結果證明本次供試單過硫酸氫鉀複合鹽制劑,投放到養殖池水中以後,其理化因子變化趨勢不盡相同,而且對可培養細菌的殺滅作用也不盡一緻。幾個顯示殺菌效果的供試制劑也需要用到很高的濃度,而按照這樣的劑量使用這種産品,其投入成本是水産養殖業者難以承受的。因此,根據本試驗獲得的結果,是否意味着随機采購的這10種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑的質量存在差異的緣故?
在本試驗研究結果中,出現2種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑在達到25.0mg/L的濃度條件下,顯示出了一定的殺菌效果,即使這2種顯示出一定殺菌效果的單過硫酸氫鉀複合鹽制劑,也并未顯示出明顯增加養殖池水中溶氧量和改變其氧化還原電位的效果。在本試驗中獲得的結果,與産品說明書中表明的作用與功效存在較大的差距。
如果按照能顯示殺菌效果的25.0mg/L的濃度計算在水産養殖池塘中的使用單過硫酸氫鉀複合鹽制劑的用量,需要達到16.7kg/667m3的用量,是水産養殖業者難以接受的高昂經濟成本,如此大量地使用這類化學制劑,對水産養殖水體會産生何種影響,也是令人擔心的問題。
因為我們在進行這個試驗之前,尚未檢測供試過硫酸氫鉀複合鹽制劑的質量。因此,尚難以判定試驗中使用的10種單過硫酸氫鉀複合鹽制劑的真假,今後還有必要對這類産品的質量做進一步檢測。
本文作者聲明
各位讀者:我們完成這個試驗并且決定将結果公布出來隻是基于一個目的:為我國廣大的水産養殖業者尋找到适宜的物質和确定其科學、合理的用法和用量,也為我國水産養殖的健康、綠色、可持續發展做出一點努力。我們不是藥企經營者也未接受任何藥企的委托。因此,不存在為了推出某種産品而打擊其他公司的同類産品的目的和主管意圖!
在此,我們熱忱地歡迎制售這類産品的企業,能安排相關人員帶着貴公司的優質産品,光臨我們的實驗室,讓我們按照上述文章中的試驗方法一起完成相關試驗,也給我們提供一次向有作為企業家學習的機會。
【關鍵字】:單過硫酸鉀氧化消毒水産養殖
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