蛋白質印迹技術(免疫印迹實驗)又稱為Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。Western Blot主要用于檢測或分析蛋白,應用領域集中在基因表達研究、抗體活性檢測和疾病診斷等。
01 蛋白質印迹基本流程圖
02 western blot步驟
蛋白轉印使用天能VE-586轉移電泳槽主要優勢在于:它可以在不埋冰的情況完成的蛋白電泳,如果配合快速轉膜液,整個電泳過程隻需不到30分鐘,可同時轉印4塊膠,操作方法也比較簡便。在縮短轉印時間的同時,實現了蛋白樣品的高效轉印。03 蛋白電泳目前常用的是SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳),蛋白質會根據分子量大小分開,分子量的蛋白會留在膠的下部,分子量大的會在膠的頂部。
04 轉膜轉膜主要是将蛋白質從凝膠轉移到膜上,常用的是NC膜和PVDF(聚偏氟乙烯),由于膜與蛋白質高度親和的能力,所以更容易與蛋白結合。為了便于觀察電泳效果和轉膜效果,可以使用蛋白預染Marker,以方便判斷蛋白分子量大小。
昆明納瑞科技提供天能VE-586以及相應的配件等
昆明納瑞科技提供轉膜過程需要的多種産品,詳情如下:
同時轉印四塊凝膠
時間節約一半
效率大大提高
最關鍵的是安全
性能特點
06 ECL化學發光反應:在工作台上鋪一張保鮮膜,将PVDF膜置于保鮮膜上。将ECL的A和B兩種試劑在EP管内等體積混合(注意吸完A試劑後吸B試劑前要更換槍頭),然後均勻滴在PVDF膜的蛋白面,反應1~2min後,将PVDF膜上多餘的ECL發光液吸幹,進行固定。
07凝膠圖象分析将膠片進行掃描或拍照,使用凝膠成像儀進行成像分析。
對于轉膜有很多的方法,常見的有幹轉和濕轉。
但是轉印的時間都是很久的,而且一次性轉印的數量也是有限的,多則4小時,少則兩小時,現在有一個神奇的設備可以快速高效的完成Western Blot的蛋白轉膜。
那麼如何解決這個難題:
天能VE-586
同時轉印四塊凝膠
時間節約一半
效率大大提高
最關鍵的是安全
性能特點
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