tRNA的作用是将特定的氨基酸帶到mRNA和核糖體複合體的特定位置,用來合成特定氨基酸序列的蛋白質。每種tRNA都有倆個作用部位:一個是與氨基酸連接的部位;另一個是反密碼子部位,可以與mRNA上的密碼子互補配對。在遺傳密碼表中共64種密碼子,在64種密碼子中,有61個是氨基酸密碼子,剩餘3種終止密碼子。因為每種tRNA上的反密碼子隻能跟mRNA上的1種氨基酸密碼子配對,所以tRNA有61種。
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