菌液PCR用來鑒定構建好的克隆或者亞克隆是可靠的。
PCR體系小一些也是可以的,隻要注意,菌液的量一定不能過多,一般10微升的PCR體系中,加入過夜培養的菌液隻需0.5微升。或者當菌在培養闆上生長出來的時候,用滅菌牙簽或者槍頭蘸取,再沾到PCR體系中,然後扔掉槍頭或者牙簽就可以了。
PCR程序的設置按正常值設置,不需要增加循環數,一般如果材料是構建成功的,15個循環就完全可以看出目的條帶。想要保證菌液PCR可靠,另一個要注意的是要設置好陽性與陰性對照,特别是陰性對照。如果是想直接從基因組裡面獲得某個基因或者片段,建議使用純的DNA模闆來操作比較好。
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