先固定發射波長,測定激發光譜;再固定激發波長,測定發射光譜;通常選擇在最大激發波長和最大發射波長進行物質測定 。
熒光光譜先要知道熒光,熒光是物質吸收電磁輻射後受到激發,受激發原子或分子在去激發過程中再發射波長與激發輻射波長相同或不同的輻射。當激發光源停止輻照試樣以後,再發射過程立刻停止,這種再發射的光稱為熒光。
激光波長對雜散光及信噪比的影響十分顯著,當狹縫寬度不變時,用氩激光514、5納米比用488納米波長激發樣品,雜散光要小一到二個數量級,并且分辨率有所提高。
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