高效液相色譜法根據分離機制的不同分為：液-固吸附色譜法、液-液分配色譜法、化學鍵合相色譜法、離子交換色譜法、凝膠色譜法和液相制備色譜法

液-固吸附色譜法

1、分離原理 液-固吸附色譜是固定相為固體吸附劑，它的分離原理是基于吸附劑表面對不同物質吸附能力的不同使混合物得到分離的。

2、固定相 液-固色譜法所用的固定相分為極性和非極性兩大類，極性吸附劑有矽膠、氧化鋁、氧化鎂等，非極性吸附劑有活性炭。極性吸附劑又分為酸性和堿性，酸性吸附劑優先吸附堿性物質，堿性吸附劑優先吸附酸性物質。

3、流動相 液-固色譜中流動相選擇的原則是：極性大的試樣選擇性極大的流動相，極性小的試樣選擇極性低的流動相。液固色譜不适宜于強極性的或離子型的樣品的分離，不适用于分離同系物。

液-液分配色譜法

1、分配原理 液-液分配色譜法的固定相和流動相都是液體。一個液相作為流動相，另一個液相分散在細顆粒的惰性擔體上做固定相，兩種液相相互共存但互不相溶。當帶有待測試樣的流動相進入色譜柱時，溶質分子溶解到兩種液相中并很快達到分配平衡，由于試樣中各組分在兩液相中分配系數的不同而達到分離。

2、固定相 液-液分配色譜常用的固定液有聚乙二烯、魚鲨烷、聚酰胺等。固定液對各組分應有不同的溶液度，但應不溶于流動相中。在液-固色譜中所用的吸附劑都可用作載體，常用的載體有全孔型載體和表面多孔型載體。

3、流動相 液-液分配色譜所用的固定相和流動相極性差别極大。

化學鍵合相色譜法

1、化學鍵合相色譜 化學鍵合相色譜是采用化學鍵合固定相的色譜。化學鍵合固定相就是利用化學反應的方法将固定液鍵合到載體表面上。化學鍵合相色譜在高效液相色譜的整個應用中占80%以上，是近代液相色譜中占據重要地位。

2、反向鍵合色譜 反向鍵合色譜采用的是非極性鍵合固定相。非極性固定相是将全多孔微粒矽膠載體，經酸化處理，主要是 各種烴基矽烷鍵合相和苯基團。

3、正相鍵合色譜 正相鍵合相色譜采用的流動相是極性小于固定相的極性，适合于中等極性樣品的分離，

4、離子對和離子抑制色譜 許多可解離的酸堿性樣品、離子及帶有可離解官能團的化合物，用一般的正相、反向色譜分離。

離子交換法

在離子交換色譜中，固定相是離子交換樹脂，流動相常是水溶液，用于離子型和可離解樣品的分離。它是利用待測樣品中各組分離子與離子交換樹脂的親和力的不同而進行分離的。

凝膠色譜法

凝膠色譜法又叫空間排阻色譜法，它與其他色譜法的分離機制不同，近似于分子篩效應，固定相和樣品分子間沒有吸附或溶解作用。凝膠色譜法的固定相為多孔性凝膠類物質，流動相為水溶液或有機溶劑，它是根據不同組分分子體積的大小進行分離的。

高效液相色譜儀

更多精彩资讯请关注tft每日頭條，我们将持续为您更新最新资讯!