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熒光光譜的原理

生活 更新时间:2024-09-13 08:33:36

概述:當激發态分子以輻射躍遷形式将其能量釋放返回基态時,便産生分子發光。依據激發的形式不同,分子發光分為光緻發光、場緻發光和化學發光等。物質分子吸收了光能而被激發,躍遷回基态所發射的電磁輻射為光緻發光。光緻發光按激發态的類型又可分為熒光和磷光兩種類型。

熒光分析儀

熒光光度計的結構組成

熒光分光光度計與紫外-可見分光光度計的基本組成部件相同,即有激發光源、激發單色器和熒光單色器、樣品池、檢測器和記錄顯示裝置五個部分。

由光源發射的光經第一單色器得到所需的激發光波長,通過樣品池後,一部分光能被熒光物質所吸收,熒光物質被激發後,發射熒光。熒光儀器的單色器有兩個,分别用于選擇激發波長和熒光發射波長。為了消除入射光和散射光的影響,熒光的測量通常在與激發光成直角的方向上進行。

1、激發光源 激發光源應有足夠的強度、适用波長範圍寬、穩定等特點。常用的光源有高壓汞燈和氙弧燈。

2、樣品池 熒光用的樣品池須用低熒光的材料制成,通常用石英,形狀以方形和長方形居多。它與吸收光譜分析法的液體池不同在于熒光樣品池的四面均為磨光透明面,同時一般僅有一種光程長度為1cm的液體池。

3、單色器 簡單的熒光計采用濾光片作為單色器,濾光片常分為帶通型及截止型兩種,帶通濾光片隻透過或吸收某波長範圍的光;截止濾光片隻讓某波長的光通過,截去其它激發光和散射光等。熒光分析儀中應用最多的單色器為光栅單色器。激發單色器用于選擇激發光的波長,發射單色器用于選擇熒光發射波長,一般後者的光栅閃耀波長比前者來得長一些。

4、檢測器 簡易型的熒光計可用目視檢測或用硒光電池、光電管檢測。

5、數據顯示裝置 熒光儀的讀出裝置有數字電壓表或記錄儀。現代儀器都配有計算機,實現儀器自動控制和顯示熒光光譜計各種參數。

分子熒光分析法及其應用

熒光分析方法的優點是靈敏度高,選擇性強,試樣量少和方法簡單,提供比較多的物理參數;熒光分析法的弱點是它的應用範圍小。因為本身能發熒光的物質相對較少,用加入某試劑的方法将非熒光物質轉化為熒光物質進行分析,其數量也不多;另一方面,由于熒光分析的靈敏度高,測定對環境因素敏感,幹擾因素較多。

采用熒光分析方法的有機化合物有多環胺類、萘酚類、吲哚類、多環芳烴、氨基酸、蛋白自等。脂肪族化合物的分子結構較為簡單,能夠産生熒光的物質為數不多。但也有許多脂肪族化合物與某些有機試劑反應後的産物具有熒光性質,據此可以測定脂肪族化合物。芳香族化合物具有共轭的不飽和結構,多能發射熒光,可以直接進行熒光測定。熒光分析的另一個應用是高效液相色譜儀的熒光檢測器。

無機化合物的熒光測定主要依賴于待測元素與有機試劑所組成的能發熒光的配合物,通過檢測配合物的熒光強度以測定該化合物的含量。

熒光光譜的原理(分子熒光光譜法)1

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