工具:随機器附帶的1.5 mm、2.5 mm、3 mm内六角扳手。
1、防卷闆的安裝
> 步驟1:取出玻璃防卷闆,拆松防卷闆組件上的黑色手擰螺母,将玻璃防卷闆裝入防卷闆支架,再将黑色的手擰螺母擰緊;
> 步驟2:将防卷闆組件上銷釘孔與刀架左側銷釘組合,并将刀架上的螺釘孔與防卷闆組件上的通孔使用螺絲連接,使用随機器附帶的2.5 mm内六角扳手将螺絲打緊。
2、防卷闆組件的安裝調試
圖1
> 步驟1:首先檢查玻璃上邊緣是否與刀片平齊,如不平齊,調整鎖緊件(7)使玻璃上邊緣下降至刀片平齊位置,平齊後兩者不平行需進行步驟2進一步調節;
> 步驟2:使用3 mm内六角扳手擰松上圖所示的螺釘(4),使擺轉臂(6)可以活動;
> 步驟3:通過1.5 mm内六角扳手調節頂絲(5)使擺轉臂(6)處于正确位置,即保證刀口與玻璃上邊緣平行(如上圖放大區域所示)。最後使用3 mm内六角扳手打緊螺釘(4);
> 步驟4:調節鎖緊件(7),使得樣本可以順利通過玻璃防卷闆與刀片間的空隙,至此調試完畢。
一、防卷闆組件調試常見問題
1、可以見到完整的切片,但切片走向玻璃防卷闆上方,不進入玻璃防卷闆
問題原因:玻璃防卷闆太低,需要通過調整鎖緊件(7),增加玻璃防卷闆高度。
2、樣品與防卷闆撞擊,切片褶皺在玻璃上
問題原因:玻璃防卷闆太高,需要通過調整鎖緊件(7),降低玻璃防卷闆高度。
二、使用防卷闆切片的操作步驟
(以瑞沃德冷凍切片機為例)
1、設置好樣本頭溫度,将凍好的樣本安裝到樣本上。
2、向前撥動搖杆将樣本移近刀口,可根據樣本與刀口的角度差異适當調整樣本頭角度。
3、使用多功能搖杆左右撥動調整切片模式為修片模式(厚度推薦20-40 μm),使用手輪通過半刀、全刀或通過慢速進樣旋鈕 半刀旋轉手輪完成粗修。(如熟練掌握搖杆進樣節奏,也可在切片模式下輕微撥動搖杆完成修片操作)。
4、粗修完成後可左右撥動多功能搖杆調整切片模式為切片模式,使用手輪通過半刀、全刀完成細修。
5、修好後掃除廢屑後即可放下防卷闆,如有需要可調整防卷闆位置(可參見一、防卷闆組件調試常見問題),使切出的樣本平整的進入防卷闆與刀片的狹縫。
6、打開防卷闆,完成貼片(如樣本發生輕微卷曲,可使用毛筆輕輕将卷曲部分輕輕攤平)。
三、使用常見問題
1、切片沾在防卷闆上
問題原因:
1)防卷闆組件冷凍不足,需要等待防卷闆組件達到冷凍箱溫度;
2)防卷闆上沾染了靜電,防卷闆本身帶有一定防靜電能力,可稍等幾分鐘或使用導電材料将靜電導向箱壁;
3)防卷闆髒污,擦去髒污;
4)防卷闆未正确固定。
2、切片無法正常進入玻璃防卷闆與刀片間的縫隙
問題原因:玻璃防卷闆高度不恰當,需要調整玻璃防卷闆高度,調試方法見調試常見問題。
3、防卷闆組件内切片打卷
問題原因:
1)樣本太大,防卷闆組件一般支持0.5 cm-1 cm左右組織,組織太大容易打卷;
2)樣本頭設置溫度偏低,可将樣本頭溫度适當上調;
3)OCT太多或樣本邊緣存在空洞,OCT包埋以剛好包住樣本為宜,樣本邊緣存在空洞時可以适當補全或重包;
4)防卷闆玻璃、刀片或刀架存在髒污或防卷闆玻璃、刀片存在損壞,擦拭防卷闆玻璃、刀片,更換防卷闆玻璃的面,更換刀片。
4、樣本上存在明顯的挂痕
問題原因:防卷闆玻璃、刀片存在損壞,更換防卷闆玻璃的面,更換刀片。
5、防卷闆掀起時樣本原本平整的切片迅速卷曲
問題原因:防卷闆溫度偏高。
四、防卷闆組件推薦使用範圍
1、50 μm防卷闆适宜切片厚度<4 μm時防卷,100 μm防卷闆适宜切片厚度5-50 μm時防卷;
2、防卷闆一般可以支持0.5-1 cm的組織防卷,如果有更大的樣本切片,建議使用毛筆輔助防卷。
,更多精彩资讯请关注tft每日頭條,我们将持续为您更新最新资讯!