生物緩沖液常用于生物化學研究實驗當中，具有極為重要的意義，是一類能夠抵制外界少量強酸和強堿的影響，維持pH值基本不變的調節液。其中經常使用的生物緩沖液有Tris 緩沖溶液、PBS緩沖溶液、CAPS緩沖液、MOPS緩沖液、TAPS緩沖液以及EPPS緩沖液。本文将從幾個方面對最常使用的Tris緩沖溶液和PBS緩沖溶液進行對比介紹。

1.緩沖範圍

三羟甲基氨基甲烷（Tris）為弱堿，分子式為C4H11NO3，分子量為121.14，在25 °C下pKa為8.1，其緩沖液的有效緩沖範圍在pH7.0~9.2之間。在生物化學實驗中常用的pH值為6.8、7.4、8.0、8.8。Tris被廣泛用于生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備，甚至有超過磷酸鹽緩沖液的趨勢。

磷酸鹽緩沖液（PBS）是以磷酸鹽為pH緩沖，氯化鈉為滲透壓平衡的鹽溶液，通常使用的有磷酸鈉緩沖液和磷酸鉀緩沖液。由于它們有二級解離，緩沖的pH值範圍很廣，是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖溶液。

2.配置方法

配制Tris-HCl緩沖液的方法有兩種：分别配制 Tris和 HCl溶液，然後按常用表中所列體積混合即可。但是由于标準濃度的稀鹽酸不易配制，所以常用另一種方法：以配置Tris-HCl緩沖液為例：先将 Tris堿溶于950 mL～970 mL 去離子水中，邊攪拌邊滴加 HCl，用pH計測定溶液pH值至所需的pH值，然後再加水進去即可。

磷酸鹽緩沖溶液的配制方法：稱NaCl， KCl， KH2PO4和K2HPO4，溶于800 mL 蒸餾水中，用HCl調節溶液的pH值至7.4，最後加蒸餾水定容至1 L。保存于4 ℃冰箱中即可。需要注意的是，通常所說的濃度指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度，而非Na 或K 的濃度，Na 和K 隻是用來調節滲透壓的。配置磷酸鹽緩沖溶液時鉀鹽比鈉鹽好，鈉鹽在低溫下不容易溶解，而鉀鹽的溶解度相對高一些。

3.使用領域

Tris緩沖溶液 在電泳緩沖液中同甘氨酸構成緩沖體系穩定pH值；在凝膠中使用Tris-HCl緩沖體系穩定pH值；被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑；Tris緩沖液的低離子強度特點還可用于線蟲的中間纖維的形成；在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”，可用于DNA的穩定和存儲；将調節pH值的酸溶液換成乙酸，獲得“TAE緩沖液”，換成硼酸可獲得TBE緩沖液。這兩種緩沖液常用于核酸電泳實驗中。

磷酸鹽緩沖溶液一般的有活性的生物制劑都要用磷酸鹽緩沖溶液來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調整适宜pH值的緩沖作用。蒸餾水不具有鹽平衡作用，會破壞生物蛋白的結構及生物特性；生理鹽水不具有調整pH的作用，對完整的、有活性的物質不能保證其在最适條件下參與生物反應，所以使用PBS是首選。當然，PBS也不是萬能的，有的生物活性物質需要的條件比較高，就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分，維持最佳的條件保證生物活性物質保持其最完整的特性。因此PBS主要用于細胞實驗，其緩沖範圍最适宜在中性。

在生物化學實驗中要慎重地選擇緩沖溶液，不僅要考慮緩沖液的緩沖範圍，還要綜合考慮緩沖液的使用環境。湖北新德晟材料專業生産研發生物緩沖液已有多年，德晟擁有獨立的研發團隊，對産品的研發生産已有十分豐富的實戰經驗。目前德晟出品的生物緩沖液等産品，已銷往全球多個國家，均收到好評複購，與衆多國外客戶達成長期合作。如果你有意向了解的話，可以來電咨詢，德晟歡迎您的來電。

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