酶動力學參數的測定方法:
1、取50毫升三角瓶4個,加入5毫升甲醛與一滴酚酞,以标準氫氧化鈉滴定至微紅色,四個瓶顔色要一緻,編号;
2、取量40克每毫升酪蛋白50毫升,加入一150毫升三角瓶,37攝氏度保溫10分鐘,同時胰蛋白酶也在37攝氏度保溫10分鐘,然後吸取5毫升酶液加到酪蛋白液中,充分混合後立即取出10毫升反應液,加入一含甲醛的三角瓶中作為1号,在2,4,6分鐘時分别取出10毫升反應液,加入2,3,4号小三角瓶中;
3、在小三角瓶中分别加10滴酚酞,用氫氧化鈉滴至微紅,在接近終點時,按耗去氫氧化鈉的毫升數,每毫升加一滴酚酞,在繼續滴至終點,記下耗去的氫氧化鈉的毫升數;
4、以滴定度對時間作圖,得一條直線,其斜率即為初速度r1;
5、分别量取30克每升、20克每升、10克每升的酪蛋白溶液,重複上述操作,分别測出r2、r3、r4;
6、用以上結果作圖求出還參數。
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