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如何進行pcr引物設計

知識 更新时间:2024-10-01 03:24:45

  原理:

  PCR引物設計的目的是為了找到一對合适的核苷酸片段,使其能有效地擴增模闆DNA序列,引物的優劣直接關系到PCR的特異性與成功與否。

  原則:

  引物應用核酸系列保守區内設計并具有特異性。産物不能形成二級結構。引物長度一般在15到30堿基之間。G加C含量在百分之40到60之間。堿基要随機分布。引物自身不能有連續4個堿基的互補。引物之間不能有連續4個堿基的互補。引物5撇端可以修飾。引物3撇端不可修飾。引物3撇端要避開密碼子的第3位。

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