劃線的形式有多種,可将一個平闆分成四個不同面積的小區進行劃線,第一區(A區)面積最小,作為待分離菌的菌源區,第二和第三區(B、C區)是逐級稀釋的過渡區,第四區(D區),則是關鍵區,使該區出現大量的單菌落以供挑選純種用。為了得到較多的典型單菌落,平闆上四區面積的分配應是D>C>B>A。
注意事項:
平闆不能倒得太薄,最好在使用前一天倒好。為防止平闆表面産生冷凝水,倒平闆前培養基溫度不能太高。用于平闆劃線的培養基,瓊脂含量宜高些,否則會因平闆太軟而被劃破。用于劃線的接種環,環柄宜長些,環口應十分圓滑,劃線時環口與平闆間的夾角宜小些,動作要輕巧,以防劃破平闆。為了取得良好的劃線效果,可事先用圓紙墊在空培養皿内畫上4區,并用接種環練習劃線動作,待通過模拟試驗熟練操作和掌握劃線要領後,再正式進行平闆劃線。
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