松鼠一般以草食性為主,食物主要是種子和果仁,也會吃鳥蛋、水果如櫻桃等。部分物種會食昆蟲,其中一些熱帶物種更會為捕食昆蟲而進行遷徒,甚至叼走山雀雛鳥。
松鼠多在春、夏季發情,發情期大約為兩個星期左右。松鼠繁殖的适齡期,雌性為8到9周齡,雄鼠為9到10周齡。在非繁殖季節,雌雄性成體分别占據一定的地方作為自己生活的活動範圍。在野外,雌性保護一定面積的地盤是為了保護食物,其内不允許其他同種個體進入,對雄性個體也是如此。但是在繁殖季節,則明顯地放鬆對領域範圍的保護,允許雄性個體進入。
松鼠懷孕的時間大約為35到40天,每年能産3胎左右,每次能産4到6隻。初生松鼠體形很小,看不見東西,以母體乳汁作為全部營養需求的來源。松鼠發育很慢,生下将近30天時才睜開眼睛。至一個半月時,小松鼠才願意到室外進行活動。
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