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脂肪細胞的原代培養

生活更新时间:2024-09-15 08:11:00

脂肪細胞的原代培養?簡介分離獲得ASC後，可以通過連續傳代使其生長和擴增原代培養後，傳代2〜3次，ASCs呈現單層，大而扁的細胞形态，其直徑在25〜30μm待細胞達到彙合時，它們形态上呈紡錘體形，類似于成纖維細胞來源：《人幹細胞培養》，下面我們就來聊聊關于脂肪細胞的原代培養?接下來我們就一起去了解一下吧!

脂肪細胞的原代培養

簡介

分離獲得ASC後，可以通過連續傳代使其生長和擴增。原代培養後，傳代2〜3次，ASCs呈現單層，大而扁的細胞形态，其直徑在25〜30μm。待細胞達到彙合時，它們形态上呈紡錘體形，類似于成纖維細胞。來源：《人幹細胞培養》

操作方法

一、脂肪幹細胞的原代培養

材料與儀器

脂肪幹細胞 ASC培養基組織培養瓶25cm2

步驟

(a)待細胞貼壁生長2〜4天後換液。

(b)換液時通過棄去培養基，從而去除未貼壁的細胞。

(c)以後每周更換培養基2次。

二、脂肪幹細胞的傳代培養

材料與儀器

脂肪幹細胞 ASC培養基PBSA胰蛋白酶組織培養瓶25cm2(T-25)細胞刮

步驟

(a)細胞達到80%彙合時即可傳代。

(b)棄去培養基，加人PBSA洗滌貼壁細胞。

(c)加入足量胰蛋白酶，使之覆蓋細胞，将培養瓶中，置于37℃，5%CO2溫箱中。

(d)細胞與胰蛋白酶共孵育3 min後，用細胞刮将細胞刮下。

(e)加人ASC培養基使胰蛋白酶失活。

(f）按照1:2比例，将細胞接種至2個T-25培養瓶中。

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