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細胞培養常用儀器

生活 更新时间:2024-08-21 12:03:25

上一篇文章我們介紹了細胞培養所需的基本試劑,解決了細胞"食物",今天我們來看看細胞的"住所"有哪些。

2D培養體系:貼壁培養和懸浮培養:

在認識細胞的"住所"之前,我們先了解下細胞的2D培養體系,目前主要有兩種基本的細胞培養體系,其中一種比較多的培養體系是使細胞在一定底物上單層生長 (即:貼壁培養),另一種是使細胞在培養基中自由漂浮生長 (懸浮培養)。此外3D細胞培養體系以後進行介紹。

細胞培養常用儀器(常用細胞培養耗材)1

貼壁細胞與懸浮細胞區别

貼壁細胞需要貼附在一個固相界面上才能生長,而隻有親水的固相界面,細胞才能貼附。像玻璃的表面是親水的,所以不需要做特殊處理,就可以用于貼壁細胞,但是由于玻璃的材質易碎、重複使用比較麻煩、重複使用會增加污染概率等不足的地方,逐漸發展到現在選擇了PS(聚苯乙烯)替代,由于PS(聚苯乙烯)的表面是疏水的,所以這個固定界面必須經過特殊處理(例如:中文名:TC處理,英文名:Tissue-culture treated),以便細胞粘附和伸展 (即:組織培養處理)。經過表面的改性處理,适合貼壁細胞的培養。而懸浮生長的細胞,就不一定需要這樣經過特殊處理過的器皿。但經過表面的改性處理後的細胞培養容器等一般也适合懸浮細胞的培養。

下面是細胞培養中所需要的一些耗材

1、細胞培養器皿:常見的有三種,細胞培養瓶(或稱易用培養瓶)、細胞培養闆、細胞培養皿。

細胞培養常用儀器(常用細胞培養耗材)2

培養瓶,闆,皿區别

無論是細胞培養器皿,必須要做到無DNA酶,無RNA酶,無熱原,無毒素認證,無菌級别達10-6,材質無生物污染融出物質等要求。

除了常用的細胞培養瓶/闆/皿之外,還有一些特殊的細胞培養容器或工具,比如:Transwell小室、細胞爬片、共聚焦小皿,像規模化細胞培養耗材還有:多層培養瓶、細胞工廠、滾瓶、培養袋等。對這些特殊産品的應用有興趣的小夥伴可以關注本公衆号,以後會在文中介紹。

以下是以Hela細胞為例給出的各培養器皿的可獲細胞數量,僅供參考。

細胞培養常用儀器(常用細胞培養耗材)3

各培養器皿的參數

2、離心管(無菌):英文名稱:centrifugal tube 或 centrifuge tube,細胞培養中,用戶分離細胞及其他溶液。離心管按照底部形狀,分為平底離心管和圓底離心管;按照蓋子閉合方式,分為壓蓋離心管和螺旋蓋離心管。常用于細胞培養的離心管主要是15ml和50ml的螺旋蓋尖底離心管。離心管必須要做到無DNA酶,無RNA酶,無熱原,無毒素認證,無菌級别達10-6,材質無生物污染融出物質等要求。

細胞培養常用儀器(常用細胞培養耗材)4

無菌離心管

3、移液管(無菌):英文名稱:transfer pipette,細胞培養過程中,往往需要進行較大體積的液體操作,由于操作的簡便性,各種規格的移液管幾乎成為細胞培養室的必備用品之一。

早期的移液管為玻璃制品,可以高溫高壓滅菌并反複使用,但是由于玻璃制品的易碎性以及反複滅菌潛在的風險,目前許多細胞培養室已經基本放棄使用玻璃制的移液管,而采用更加方便、安全、準确的一次性塑料制移液管。無論是哪種移液管,必須要做到無DNA酶,無RNA酶,無熱原,無毒素認證,材質無生物污染融出物質等要求。

配合移液管使用從而實現較大體積液體操作的常用工具是洗耳球或者電動移液管移液器。如今絕大多數用戶使用的是電動移液管移液器,但電動移液器是采用手動控制吸、排液操作,在排液末端,由于壓力過小的原因,往往會有部分液體不能徹底排淨,同時由于其吸取液體量并不能預先設定,所以,操作準确性往往較差,因此,移液管更适用于精确度要求不高的大體積液體操作,屬于常量移液器。

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血清移液管

4、細胞凍存管(無菌):英文名名稱:ultra-low temperature preservation tube,用于細胞的低溫運輸和儲存的容器。常規的凍存管規格1.5ml、1.8ml、2.0ml、5.0ml,根據樣本量及類型,還可以選擇凍存袋等。凍存管根據蓋子的設計,分為外旋凍存管和内旋凍存管。為了樣本庫更嚴格的質控管理,有些廠家還有印有二維碼的2D凍存管。無論是哪種凍存容器,必須要做到無DNA酶,無RNA酶,無熱原,無毒素認證,無菌級别達10-6,材質無生物污染融出物質等要求。

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内旋凍存管和外旋凍存管區别

5、一次性細胞刮刀/鏟刀:英文名稱:Cell scraper,通常采用優質的聚乙烯材料加工成型,具有比較好的韌性,保證在收集細胞過程中保護細胞,收集細胞的輔助工具。

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細胞刮刀

6、除菌過濾器(無菌):用于制備培養基或者與細胞接觸的相關試劑,孔徑通常為0.22μm或0.1μm。根據待過濾樣品的體積,可以選擇不同的過濾器材,比如針頭濾器、頂式濾器等。

7、吸頭(無菌):最常用的一次性的消耗品,用于任何分子生物學和基因學研究的應用,其在移液器和樣品之間有效的形成保護結構,保證吸樣和分樣的安全性。容量範圍通常從0.1 – 5000ml。用于細胞實驗的吸頭,必須要做到無DNA酶,無RNA酶,無熱原,無毒素認證,材質無生物污染融出物質等要求。

8、其他耗材:細胞篩網、凍存盒(用于收納和管理凍存管)、酒精燈、手套、無菌實驗服、消毒水、液體儲存瓶(用于儲存各種配制好的培養液、血清等液體,常用規格有 500 ml、250 ml、100 ml 等)。

細胞培養、凍存、操作耗材的正确與細胞生長狀況的好壞密切相關,所以我們在選用細胞培養的耗材時,首要條件是無菌,尤其是培養和涉及低溫操作的耗材時,還要考慮其低溫耐受性以及安全性等。

下面是在科研中使用比較多的耗材品牌(排名不分先後)。

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細胞培養耗材品牌

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