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培養基的制備及高壓蒸汽滅菌

生活 更新时间:2024-10-18 13:06:39

培養基的制備及高壓蒸汽滅菌(培養基及無菌水的制備方法)1

一、基本原理

培養基的種類很多,不同微生物所需要的培養基不同.培養基制成後的物理狀态可分為液體、固體、半固體三種類型.目前所用培養基均為已配制好的生物試劑和紙片。

二、器材

三角瓶、試管、燒杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、鋁箔紙、角匙、杜氏小管、矽膠塞、電爐。

三、培養基的種類

營養瓊脂培養基、乳糖膽鹽發酵培養基、乳糖發酵培養基、伊紅美蘭瓊脂培養基、馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基(附加抗菌素)、平闆計數瓊脂、月桂基硫酸鹽胰蛋白凍肉湯、煌綠乳糖膽鹽肉湯、EC肉湯、高鹽察氏瓊脂、三糖鐵瓊脂等。

四、方法步驟

1、培養基的制備:

(1)稱量:根據培養基的配方,稱取适量藥品于搪瓷杯中;

(2)溶解:用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;

(3)分裝:根據不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長的1/5(需根據試管的大小而定).液體培養基如乳糖膽鹽發酵培養基約分裝10毫升左右.

(4)塞矽膠塞:裝好培養基的試管應塞上矽膠塞,松緊合适,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入内,這樣即可過濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養基水分的蒸發.

(5)包裝:三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包紮,試管集中于試管簍.

2、無菌水的制備:

(1)用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水(稀釋水)裝入試管中.

(2)用100ml量筒量取95ml蒸餾水(稀釋水)裝入150ml的三角瓶中.可置少許玻璃珠于三角瓶内,防止暴沸.

(3)量取240ml蒸餾水(稀釋水)于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮紙包紮好,高壓滅菌備用.

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