大家在閱讀液相色譜的文章的時候，經常能夠看到各種名字的“體積”，比如死體積、駐留體積、延遲體積、孔隙體積、空體積、滞留體積、柱體積、柱外體積、擴散體積等等等等，簡直是讓人頭昏眼花……

這些形形色色的“體積”到底都是些什麼東西？它們對我的液相分析到底意味着什麼呢？

今天我們就帶大家一起來看看。

首先要說的是，液相色譜溶劑從溶劑瓶出發、最終從檢測器出來去到廢液桶，中間會經過各個模塊的各種管路，上面提到的這些不同“體積”的概念，就是不同管路的各種集合。

接下來，從這些體積的意義，或者對于液相分析的影響來看，它們主要可以分成兩個大的部分，對于流動相的影響，以及對于樣品的影響。

01關鍵詞：延遲體積

我們首先來看對于流動相的影響。

相信絕大多數使用液相的同學都是使用梯度方法，當然也使用泵來在線混合流動相的。我們也知道流動相的比例的改變會改變它的洗脫強度，從而改變樣品的出峰時間和分離度。但是，流動相的比例的改變是需要到色譜柱上面才能對分離産生影響的。

（點擊觀看視頻“單元泵、二元泵、四元泵分别都是什麼原理”）

這樣從流動相混合點開始，到色譜柱的柱頭這中間所有的體積，就叫做延遲體積（Delay Volume），因為流動相比例的變化因為這一段體積而被延遲了。

有時候，這個體積也被叫做梯度延遲體積（Gradient Delay Volume）、駐留體積（Dwell Volume），有時候這個Dwell Volume也被翻譯成滞留體積，這個是容易讓人産生混淆的地方，因為這裡的滞留是指的流動相的滞留，稍後我們還會講到樣品的滞留。

02關鍵詞：空隙體積

接下來是體積對于樣品的影響。

大家都知道，樣品一旦進入了液相系統，被流動相帶着往前運動的過程中，自身也會因為熱力學運動産生擴散，所以在等度液相的條件下，越往後出的峰，峰寬一般都越寬。

（點擊觀看視頻“如何獲得最窄的峰寬，最佳的柱效”）

一般來說，樣品由自動進樣器引入系統，可能經過了自動進樣器内部的一些管路後，通過進樣器到柱溫箱的色譜柱。色譜柱的體積包括了填料的體積、以及填料間空隙的體積。

一般對于多孔矽膠填料的色譜柱來說，填料之間的體積占到了色譜整體體積的60%左右。我們一般把這部分叫做色譜柱的空體積/空隙體積（Column Void Volume）或者填料間體積（Interparticle Volume）。

03關鍵詞：滞留體積、死體積

在色譜柱中，樣品也會在矽膠小球的空隙中持續地運動擴散。這種擴散會一直持續到檢測器的流通池。整個這段樣品擴散的體積就叫做液相色譜的滞留體積（Holdup Volume），或者是系統空體積/空隙體積（System Void Volume）。

請注意，這裡是針對樣品的滞留來說的，它包括了色譜柱内部填料空隙的體積（Interparticle Volume），以及從進樣點到被檢測到的所有的管路和接頭的體積。後面這部分也别叫做柱外體積（Extra-Column Volume）或者死體積（Dead Volume）。

04關鍵詞：餾分收集的延遲體積

大多數時候，樣品隻要從檢測器出來了，我們就不關心了它了，所以我們也不太去關心廢液管的體積了。

但是隻有一種情況例外，就是色譜分離檢測到的樣品，我還想要使用餾分收集器去把這些分開的化合物收集起來，去做進一步的分析。我們把這樣的液相叫做制備液相。

（點擊觀看視頻“制備液相與分析液相有什麼不同”）

餾分收集器都是跟檢測器配合起來工作的，一旦檢測器檢測到有樣品過來，就會告訴餾分收集器準備好去收集了。

但是它們之間是有一個時間差的，原因就是從檢測器到餾分收集器之間的管路的體積。

這個體積，通常也被叫做延遲體積（Delay Volume），不過請注意這個是指的樣品從檢測器到餾分收集器的延遲，跟之前提到的流動相的混合的延遲完全不是一會兒事兒。

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