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細胞培養中吹瓶子過程

圖文 更新时间:2024-11-23 15:01:43

細胞搖瓶是一種經濟實惠的細胞培養工具,主要用于對氧氣要求比較高的細胞系,如在懸浮液中培養的細菌、真菌、動植物細胞等。靈芝的液體發酵與菌種制作中也用到了這種工具,在培養時對氧氣、接種量也有一定的要求。

細胞培養中吹瓶子過程(細胞搖瓶培養靈芝對氧氣和接種量的要求)1

500ml三角細胞搖瓶

1、氧氣

深層發酵培養時,菌絲生長快,所以對氧的需要量非常高,在開始11~18小時内,若發酵液中氧含量不能滿足靈芝菌絲生長的需要,将會嚴重影響細胞搖瓶中菌絲的生長。但在發酵初期,發酵液中菌絲量少,所以需氧量也可少些,菌絲進入旺盛生長期時,需要的氧量就增加,這時發酵罐通氣量應控制到約0.51(v/v min),即每1m³的發酵液中,每分鐘應通入無菌純淨空氣約0.51m³。發酵後期,菌絲衰老,代謝能力下降,呼吸量也降低,所以通氣量可适當減少。通氣發酵培養時,要不斷的攪拌,攪拌能使氧氣均勻的分布在發酵液中,通過攪拌,發酵液中可溶解更多的氧氣,菌絲分布也均勻,但攪拌速度不能太快,攪拌速度太快菌絲容易産生損傷。

細胞培養中吹瓶子過程(細胞搖瓶培養靈芝對氧氣和接種量的要求)2

血清培養基瓶

2、接種量

液體深層發酵培養時,菌絲生長速度與接種量有關,接種量多,菌絲生長快,雜菌感染率低,但菌絲老化快,接種量少,菌絲生長慢,菌絲老化也慢,但若在較長時間中,發酵液中沒有足夠的靈芝菌絲時,抗菌性就會降低,所以接種量過少時,容易感染雜菌。

細胞培養中吹瓶子過程(細胞搖瓶培養靈芝對氧氣和接種量的要求)3

細胞培養瓶

此外,在利用細胞搖瓶進行靈芝的液體培養所用的菌種必須菌齡短、生命力旺盛、生長速度快,這樣才能縮短發酵周期短,提高經濟效益高,菌種生命力強,抗雜菌能力也強。菌齡老、生命力弱、生長速度慢也容易感染雜菌。

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