丙酮酸羧化酶是糖異生途徑的關鍵酶。丙酮酸羧化酶存在于線粒體中,是催化下列不可逆反應的酶。丙酮酸羧化酶EC6.4.1.1.丙酮酸+CO2+ATP+H2O→草酰乙酸+ADP+Pi,ΔGo′=-0.5kcal.廣泛存在于動物、黴菌和酵母中,但在植物體和大部分細菌中卻不含此酶。在三羧酸循環中,它是供給草酰乙酸的主要補充反應。為一種變構酶,有乙酰CoA時,其活性存在,同時含有生物素作為和CO2反應的酶的輔酶。分子量約65萬,有很多亞基。最适pH為4.8。
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