富集培養,取約1克土樣加入裝有牛肉膏蛋白胨液體培養基的三角瓶中,置于80至90℃水浴加熱10至15分鐘,然後經30℃振蕩培養24小時;初篩平闆塗布分離,将培養液再經一次熱處理,适當稀釋後,取0.1毫升,塗布在酪蛋白平闆上,30℃培養24至48小時;平闆菌落的轉接培養,将酪蛋白平闆上長出的透明圈直徑與菌落直徑比值較大的菌落,編号依次對應接到牛肉膏蛋白胨培養基斜面上,30℃培養24至48小時,備用;搖瓶發酵,将酪蛋白平闆上長出的透明圈直徑與菌落直徑比值較大的菌落進行發酵,并測定酶活;純化與保藏,将酶活高的菌株采用劃線分離法或塗布分離法進一步純化,然後将菌種進行保藏。
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