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真菌和細菌的培養條件

生活 更新时间:2024-09-27 20:14:34

冬天已經過去了大半了 ,春天就要來了,實驗室在一樓,地下室或者其他容易潮濕的地方的小盆友又要開始新一輪的防細胞污染大戰了。

請遵守細胞污染永恒定律:無論什麼細胞隻要是不重要的細胞污染了,立刻加84棄之,重新複蘇新凍存管培養;實在需要挽救的請參考以下:

細菌污染:主要有洋蔥霍爾伯德菌型污染

确定是非常珍貴的細胞 建議分别配置含10倍慶大黴素和兩性黴素溶液(G/A)的PBS和5倍慶大黴素和兩性黴素溶液(G/A)的完全培養基各一份。然後先用10倍雙抗的PBS洗滌細胞5-10次, 然後用5倍雙抗的完全培養洗滌細胞3次以上,再加上含雙倍的G/A溶液放培養箱培養,一個小時後換液,持續4個小時後,再加上正常培養細胞所需的抗生素,過夜,到最終确定細胞沒有任何污染物,因此時細胞受損過大,建議優化培養基方式(血清提高2%-5%)或者立即凍存細胞,一個月後複蘇。

真菌和細菌的培養條件(細胞培養之真菌)1

真菌污染:

污染的多是曲黴菌,白色念珠菌,酵母菌,黑黴菌,孢子菌,真菌主要以預防為主,防治為輔,已經污染了,建議采用以下方法:

1. 細胞一旦污染,很難挽救,即使使用制黴菌素或放線菌素D,也是傷敵八千自損一萬的辦法,可使用抗生素進行查殺,但是高濃度的抗黴菌素對細胞有毒性作用。

2. 把所有細胞從污染的CO2孵箱轉移,采用過氧乙酸擦洗孵箱(全部,尤其四個角)。并把過氧乙酸放置在孵箱内一個小時,使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散後,再移入細胞;

3. 用0.5%新潔爾滅擦拭超淨台和牆壁,确保不留死角,地面用新潔爾滅消毒液拖地。

4. 将環境徹底消毒,整個培養間高錳酸鉀或者乳酸熏蒸,孵箱内部包括托盤等全部用苯酚搽洗,封閉2天。

真菌和細菌的培養條件(細胞培養之真菌)2

真菌污染預防方法:

1),将細胞移出來,用微量硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盤裡加适量硫酸銅或者酸氫二鈉高鹽液體防止黴菌

2)孵箱應定期清潔,大約一個月左右清潔一次,

3)可在培養基裡加兩性黴素或制黴菌素)或[放線菌素D或雙抗進行預防。

4)最主要的還是要培養良好的無菌觀念,實驗室盡量不要大聲說話,佩戴好口罩,手套,操作時應小心,避免培養基撒入培養箱以及生物安全櫃,這些撒入培養箱的培養基為細菌及真菌的繁殖提供了很好的條件。

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