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蔗糖轉化反應速率常數的測定

生活 更新时间:2024-12-19 19:55:03

蔗糖酶(-D-呋喃型果糖苷**酶EC3.2.1.26):

1. 配12支蔗糖底物濃度分别為0、0.005、0.00625、0.0075、0.00875、0.010、0.0125、0.015、0.02、0.025、0.0375、0.050M(在35度水浴保溫);

2. 加入3單位/毫升的酶溶液(已在35度水浴保溫),準确作用5分鐘,終止反應;

3. 各吸取0.5毫升反應液與3,5-二硝基水楊酸,沸水浴5分鐘,冷卻後在540nm測定吸光度OD值;

4. 作圖。

酶濃度對酶反應的影響:當底物濃度足夠大時,所有的酶都被底物結合,酶促反應速度達到最大。

V=Vmax = K3[E]

蔗糖轉化反應速率常數的測定(蔗糖酶米氏常數)1

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