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細胞内液和組織液滲透壓的大小

生活 更新时间:2024-09-15 18:24:28

細胞内液和組織液滲透壓的大小? 有的時候我們在做免疫熒光和免疫組化的時候,都需要進行組織的處理,然後使用冰凍切片或者是石蠟切片,本人是做眼科方向的,有時候需要将大鼠或者小鼠的眼球包埋後進行冰凍切片,但是最近反映出來一個問題就是在組織的固定以及脫水的過程中,我所處理的組織發生了皺縮和塌陷的情況,最後得到的效果就是我所要的結構和區域根本切不出來,所以針對這個問題查閱了一些資料,慢慢的發現這裡邊的一些問題,所以在這裡跟大家分享一下,今天小編就來聊一聊關于細胞内液和組織液滲透壓的大小?接下來我們就一起去研究一下吧!

細胞内液和組織液滲透壓的大小(組織固定及脫水)1

細胞内液和組織液滲透壓的大小

有的時候我們在做免疫熒光和免疫組化的時候,都需要進行組織的處理,然後使用冰凍切片或者是石蠟切片,本人是做眼科方向的,有時候需要将大鼠或者小鼠的眼球包埋後進行冰凍切片,但是最近反映出來一個問題就是在組織的固定以及脫水的過程中,我所處理的組織發生了皺縮和塌陷的情況,最後得到的效果就是我所要的結構和區域根本切不出來,所以針對這個問題查閱了一些資料,慢慢的發現這裡邊的一些問題,所以在這裡跟大家分享一下。

今天呢,先跟大家聊一下,固定液的種類(我試用過的)

(1)最常見的4%的多聚甲醛(PFA)-0.1 mol/L的磷酸鹽緩沖溶液(PH=7.3)具體的配置方法呢網上是都有的,這個就不再細說了。

(2)Karnovsky's固定劑(文獻中看到的)。這一款的話,其主要的成分就是PFA和25%的戊二醛水溶液。4℃下可以短時間的固定,我一般還是固定過夜,這一種的話,比較溫和,比在較低濃度的戊二醛中長時間固定更能保存組織的抗原性和細微結構。

配方大概一說吧,我配的是1000mL的,PFA:30g;25%戊二醛:80mL;0.1 mol/L的PB稀釋至1000mL.

(3)4%的多聚甲醛(PFA)-磷酸二氫鈉和氫氧化鈉的溶液。

配方:A液:PFA:40g 三蒸水:400mL

B液:Na2HPO4·2H2O:16.88g 三蒸水:300mL

C液:NaOH:3.86g 三蒸水:200mL

這個固定劑是比較溫和的,适合于組織的長期保存,把他放到4度冰箱裡邊保存數月後也可以獲得比較滿意的結果。

當然了,這幾種固定劑是我自己嘗試過的,适合我自己需求的,當然還有其他的一些固定劑,歡迎大家評論。這幾種固定劑呢,都需要調節PH,并且呢都需要使用濾紙過濾一下是最好的。

下一期将跟大家說一下,配制固定劑和脫水劑的時候,所采用的溶劑不同,會對最終組織産生的結果會有什麼樣的不同。

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