在實驗室中，某些對于動物的研究課題試驗，往往需要先将動物組織進行研磨前處理，而手動研磨不容易達到預期的研磨效果，不能獲取到合格的檢測樣品。實驗室研磨動物組織，我們可以借助專用的動植物組織研磨儀器，簡便且有效，下面東方天淨就來詳細介紹下動物組織研磨方法步驟及注意事項。

一、實驗前的準備

1、在實驗操作前，先将PBS緩沖液(磷酸緩沖鹽溶液，phosphate buffer saline)進行4℃預冷，然後準備若幹冰塊備用。

2、使用75%濃度的乙醇溶液對鑷子、剪刀進行消毒處理，如果還需對動物組織進行RNA提取，還要使用酒精燈對鑷子和剪刀進行再次消毒，以盡可能消除RNA酶。

3、所有實驗耗材都應進行高溫高壓滅菌，以保證各種酶不會對後續實驗産生影響。

4、将2ml離心管置于冰塊上，并加入适量的PBS緩沖液，一般情況下，實驗所需的組織勻漿的質量體積比為10%(即0.1g組織樣本加入1ml液體)。

5、将需要進行研磨的組織樣本從零下80℃的冰箱内取出，置于冰上，使用滅菌後的鑷子和剪刀，将樣本切成小塊(每塊重量不宜超過0.02g，總重量不宜超過0.2g)，然後放入加好相應液體的離心管中，備用。

6、取出已經滅菌的氧化锆研磨球，按照每個離心管一顆的數量，将锆球放入離心管中。此過程需使用鑷子進行該操作，并且盡量避免液體飛濺而導緻樣本污染。

二、組織研磨

1、将放入樣品和锆球的離心管标記好編号，然後放入專用的研磨适配器中，蓋好蓋子，将适配器固定在研磨機上。

2、設置振動頻率為1000次/分鐘，振動時間為5分鐘。

3、由于振動過程中的撞擊和摩擦，會産生大量熱量，使得離心管溫度升高，所以可以選擇具有低溫控制功能的設備，或者将适配器放入液氮罐進行預冷凍，并減少研磨時間，避免高溫對樣本的破壞。

三、組織上清的吸取及保存

1、将研磨完成後的離心管放入低溫環境下的高速離心機内，以4000rpm的速度離心30分鐘。

2、将所得的上清液用移液器取出，轉入至新的離心管内，并于零下80℃的環境長期保存。

1、需要研磨的樣本一定要在冰上操作，保證低溫環境，這樣可以降低樣本中蛋白質(或RNA)的降解速度。

2、所有實驗操作均需佩戴醫用口罩、手套，并且穿戴好實驗服。

3、在進行離心操作前，需要提前開啟離心機，讓離心機預冷，保持4℃左右的低溫環境。

4、研磨使用的氧化锆研磨球一定不能多放，數量過多會導緻管壁破裂，從而造成樣本丢失或污染。

5、使用移液器吸取上清液時，不要吸取到沉澱。

附：實驗所需儀器、工具及試劑

儀器：TJS三維振動球磨機、低溫高速離心機

工具：氧化锆研磨球、移液器、手術用剪刀、2ml離心管、鑷子

試劑：PBS緩沖液、RIPA裂解液、75%濃度乙醇溶液、Trizol試劑

關于實驗室動物組織研磨的方法步驟及相關注意事項就為大家介紹到這裡了，使用東方天淨TJG-215動植物組織研磨儀或TJS三維振動球磨機，搭配研磨适配器，就能将各類動物組織進行快速有效的研磨。

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