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鍊終止法原理

知識 更新时间:2024-11-19 16:42:12

  通過合成與單鍊DNA互補的多核苷酸鍊,由于合成的互補鍊可在不同位置随機終止反應,産生隻差一個核苷酸的DNA分子,從而來讀取待測DNA分子的順序。核酸模闆在核酸聚合酶、引物、四種單脫氧堿基存在條件下複制或轉錄時,如果在四管反應系統中分别按比例引入四種雙脫氧堿基,隻要雙脫氧堿基摻入鍊端,該鍊就停止延長,鍊端摻入單脫氧堿基的片段可繼續延長,如此每管反應體系中便合成以共同引物為5端,以雙脫氧堿基為3端的一系列長度不等的核酸片段。反應終止後,分四個泳道進行電泳。以分離長短不一的核酸片段,根據片段3端的雙脫氧堿

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