RT—PCR(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction)意思是将RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鍊式擴增(PCR)相結合的技術。
擴展資料
首先經反轉錄酶的作用,從RNA合成cDNA,再以cDNA為模闆,在DNA聚合酶作用下擴增合成目的片段。RT—PCR技術靈敏而且用途廣泛,可用于檢測細胞中基因表達水平、細胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作為模闆的RNA可以是總RNA、mRNA或體外轉錄的`RNA産物。無論使用何種RNA,關鍵是确保RNA中無RNA酶和基因組DNA的污染。用于反轉錄的引物可視實驗的具體情況選擇随機引物、OligodT及基因特異性引物中的一種。對于短的不具有發夾結構的真核細胞mRNA,3種都可。
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