生物姐：

最近到期末，很多同學留言需要關于生物實驗的知識點，生物姐周末就給大家準備了一份生物實驗大全，期末考試希望大家用得上。如果你考完了，也沒有關系，可以收藏了進行預習和複習喔！

四、用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體

1.實驗原理

(1)葉綠體呈綠色、扁平的橢球形或球形，不需染色，制片後直接觀察。

(2)線粒體呈無色，有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等，用健那綠染液染成藍綠色後制片觀察。

2.實驗步驟

(1)觀察葉綠體

(2)觀察線粒體

[深度思考]

(1)觀察葉綠體時，為什麼常用藓類葉片？

提示　藓類葉片很薄，僅有一兩層葉肉細胞，可以直接用來制作臨時裝片。

(2)選菠菜葉作為觀察葉綠體的材料，為什麼要撕取帶少許葉肉的下表皮？

提示　葉綠體主要分布在葉肉細胞中，葉表皮處無葉綠體，接近下表皮處為海綿組織，細胞排列疏松，易撕取。

(3)觀察線粒體時，為什麼選健那綠染液進行染色，觀察葉綠體為何不需染色？

提示　健那綠是專一性用于線粒體染色的活細胞染料，染色後不影響細胞的生命活動；葉綠體本身含有色素，不需染色即可觀察。

(4)觀察葉綠體時，臨時裝片中的材料要随時保持有水狀态的原因是什麼？

提示　保持有水狀态以保證葉綠體的正常形态，并能懸浮在細胞質基質中。否則，細胞失水收縮，将影響對葉綠體形态的觀察。

[易錯警示]

走出葉綠體、線粒體觀察實驗的“5”個誤區

(1)觀察線粒體應選擇人體或動物細胞或植物體無色部位細胞，不能選擇綠色組織細胞。

(2)觀察線粒體與葉綠體均需保持細胞活性狀态。

(3)觀察葉綠體時需保持葉片有水狀态，防止失水。

(4)制作觀察線粒體的臨時裝片時，是滴一滴健那綠染液于載玻片中央用于染色，而不是滴一滴生理鹽水。

(5)葉綠體不僅随細胞質的流動而流動，還随光照方向的改變而旋轉，一般葉綠體以正面朝向光源，以利于接受更多光照。

五、觀察植物細胞的質壁分離和複原

1.實驗原理

(1)成熟的植物細胞的原生質層相當于一層半透膜。

(2)細胞液具有一定的濃度，能滲透吸水和失水。

(3)原生質層比細胞壁的伸縮性大得多。

2.實驗步驟

[深度思考]

(1)實驗時一定要選擇紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞嗎？

提示　不一定。但紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞的細胞液中含有色素，使液泡呈現紫色，更有利于觀察。

(2)為什麼選用紫色洋蔥鱗片葉的外表皮？根尖分生區的細胞能否作為該實驗的材料？

提示　紫色洋蔥鱗片葉外表皮具有紫色的大液泡，便于觀察；根尖分生區的細胞無大液泡，不發生質壁分離，不能作為該實驗的材料。

(3)選擇試劑時，為什麼選用0.3 g/mL的蔗糖溶液而不用0.5 g/mL的蔗糖溶液？

提示　使用濃度過高的蔗糖溶液(0.5 g/mL)，質壁分離現象明顯，但不能複原，因為溶液濃度過高導緻細胞過度失水而死亡。

(4)适宜濃度的KNO3溶液或尿素、甘油、乙二醇等能否作為該實驗的試劑？為什麼？鹽酸、酒精、醋酸等行嗎？為什麼？

提示　K＋和NO3

－

可被細胞吸收，從而使細胞液濃度增大，所以細胞先發生質壁分離後又自動複原，不适于作為該實驗的試劑(尿素、甘油、乙二醇等現象同上)。鹽酸、酒精、醋酸能殺死細胞，不能作為質壁分離實驗的試劑。

(5)該實驗無獨立的對照組，為什麼還叫對照實驗？

提示　該實驗中，實驗組和對照組在同一裝片中先後進行，屬于自身對照。

[歸納整合]

1.關于細胞質壁分離和複原實驗的注意點

(1)本實驗存在兩組對照實驗

(2)引發質壁分離的兩種原因

(3)本實驗是教材中涉及“顯微觀察”實驗中唯一的一個“隻在低倍鏡下”觀察(不曾換“高倍鏡”)的實驗。

2.植物細胞質壁分離及質壁分離複原的拓展應用

(1)判斷成熟植物細胞是活細胞還是死細胞

(2)測定細胞液濃度範圍

(3)比較不同成熟植物細胞的細胞液濃度

(4)鑒别不同種類的溶液(如KNO3和蔗糖溶液)

六、探究影響酶活性的因素

1.實驗原理

(1)探究溫度對酶活性的影響

①反應原理：澱粉澱粉酶麥芽糖

碘↓液 碘↓液

藍色 無藍色出現

②鑒定原理：溫度影響酶的活性，從而影響澱粉的水解，滴加碘液，根據是否出現藍色及藍色的深淺來判斷酶的活性。

(2)探究pH對酶活性的影響

①反應原理(用反應式表示)：

②鑒定原理：pH影響酶的活性，從而影響氧氣的生成量，可用帶火星的衛生香燃燒的情況來檢驗O2産生量的多少。

2.實驗步驟

(1)溫度對酶活性的影響

實驗操作内容

試管1

試管2

試管3

底物控制

2 mL 3%的可溶性澱粉溶液

溫度控制

60 ℃熱水

沸水

冰塊

酶控制

1 mL相同溫度的2%新鮮澱粉酶溶液

試劑控制

等量的碘液

觀察指标

檢測是否出現藍色及藍色的深淺

(2)pH對酶活性的影響

實驗操作内容

試管1

試管2

試管3

底物控制

2 mL 3%的過氧化氫溶液

pH控制

1 mL蒸餾水

1 mL 5%的HCl

1 mL 5%的NaOH

酶控制

2滴過氧化氫酶溶液

觀察指标

氣泡的産生量

[深度思考]

(1)為什麼不用過氧化氫酶探究溫度對酶活性的影響？

提示　過氧化氫酶催化的底物是H2O2，H2O2在高溫時分解，這樣實驗中就存在兩個變量，使實驗結果受到幹擾。

(2)在探究溫度對酶活性的影響實驗中，能否用斐林試劑來檢測實驗産物？

提示　不能。斐林試劑與還原糖隻有在加熱的條件下才有磚紅色沉澱生成，而該實驗需嚴格控制不同的溫度。

(3)探究溫度、pH對酶活性的影響實驗中，自變量和因變量分别是什麼？

提示　探究溫度對酶活性的影響實驗中，自變量是溫度，因變量是澱粉水解程度。探究pH對酶活性的影響實驗中，自變量是pH，因變量是過氧化氫的分解速率。

(4)整個實驗過程中，除溫度或pH之外，其餘的變量為什麼相等或相同？

提示　實驗設計遵循單一變量原則，這樣可以排除無關變量對實驗結果造成影響。

(5)在探究溫度或pH對酶活性影響的實驗中，控制條件的步驟和酶量控制的步驟為什麼一定不能颠倒順序？

提示　若控制條件的步驟和酶量控制的步驟颠倒順序，會在調節溫度或pH的過程中，酶先将底物分解，導緻實驗失敗。

[歸納整合]

1.用梯度法确定酶的最适溫度和pH

設計思路：常用“梯度法”來探究酶的最适溫度(或pH)，設計實驗時需設置一系列不同溫度(或pH)的實驗組進行相互對照，最後根據實驗現象得出結論——酶促反應時間最短的一組所處的溫度(或pH)即為最适溫度(或pH)。相鄰組間的差值(即梯度值)越小，測得的最适溫度(或pH)就越精确。

2.酶實驗探究的兩種方法

(1)試劑檢測探究酶的本質

①設計思路：從酶的化學本質上來講，絕大多數酶是蛋白質，少數酶是RNA。在高中教材中常見的一些酶，如澱粉酶、蛋白酶等，其本質都是蛋白質。所以，對酶本質的驗證常常是變相地考查蛋白質的鑒定方法。因此，使用雙縮脲試劑進行鑒定即可。

②設計方案

項目

實驗組

對照組

材料

待測酶溶液

已知蛋白液(等量)

試劑

分别加入等量的雙縮脲試劑

現象

是否呈現紫色

呈現紫色

結論

呈現紫色說明該酶的化學本質為蛋白質；否則該酶的化學本質不是蛋白質

(2)對比法探究酶的高效性

①設計思路：通過将不同類型催化劑(主要是酶與無機催化劑)催化底物的反應速率進行比較，得出結論。

②設計方案

項目

實驗組

對照組

材料

等量的同一種底物

試劑

與底物相對應的酶溶液

等量的無機催化劑

現象

反應速度很快，或反應用時短

反應速度緩慢，或反應用時長

結論

酶具有高效性

(3)對比法探究酶的專一性

①設計思路：常見的方案有兩種，即底物相同但酶不同或底物不同但酶相同，最後通過觀察酶促反應能否進行得出結論。

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