貓頭鷹絕大多數是夜行性動物,晝伏夜出,白天隐匿于樹叢岩穴或屋檐中不易見到,但也有部分種類如斑頭鸺鹠、縱紋腹小侏儒貓頭鷹鸮和雕鸮等白天亦不安寂寞,常外出活動;一貫夜行的種類,一旦在白天活動,常飛行颠簸不定有如醉酒。
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食物以鼠類為主, 也吃昆蟲、小鳥、蜥蜴、魚等動物。它們都有吐“食丸”的習性,其素囔具有消化能力,食物常常整吞下去,并将食物中不能消化的骨骼、羽毛、毛發、幾丁質等殘物渣滓集成塊狀,形成小團經過食道和口腔吐出,叫食丸。
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